[发明专利]用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒及用途在审
| 申请号： | 202210984447.1 | 申请日： | 2022-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN115992235A | 公开（公告）日： | 2023-04-21 |
| 发明（设计）人： | 刘稚;梁利波;何訸;张玫 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都虹桥专利事务所(普通合伙) 51124 | 代理人： | 许泽伟 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 肝癌 预后 检测 试剂盒 用途 | ||
1.基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：包括扩增所需的如下引物：核苷酸序列如SEQ ID No.1～SEQ ID No.9所示：
其中，外引物为F3、B3，内引物为FIP、BIP，环引物为LF-1、LF-2、LB-1、LB-2、LB-3中至少一种。
2.根据权利要求1所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：包括扩增所需的如SEQ ID No.1～SEQ ID No.4所示引物和第1～7组中任意一组环引物：第1组：LF-1；第2组：LB-1、LF-2；第3组：LB-2、LF-2；第4组：LB-3、LF-2；第5组：LB-1、LF-1；第6组：LB-2、LF-1；第7组：LB-3、LF-1。
3.根据权利要求2所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：包括扩增所需的如SEQ ID No.1～SEQ ID No.4所示的引物、如SEQ ID No.8和SEQ ID No.7所示的环引物LB-2、LF-2。
4.根据权利要求1～3任一项所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：包括对目的基因Linc00853进行检测，其核苷酸序列如SEQ ID No.14所示。
5.根据权利要求1～3任一项所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：还包括Bst聚合酶、荧光染料、矿物质油。
6.根据权利要求1～3任一项所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：其反应温度为61～67℃；优选地，反应温度为63℃。
7.根据权利要求1～3任一项所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：内引物：环引物：外引物的浓度比例为4～8：1～4：1；优选地，内引物：环引物：外引物的浓度比例为8：4：1。
8.根据权利要求1～3任一项所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒，其特征在于：聚合酶酶量为0.5～2μL；优选地，所述酶量为1μL。
9.权利要求1～8任一项所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：
a、以pUC57作为载体，构建含目的基因Linc00853的pUC57-Linc00853质粒；
b、通过选择引物、反应温度、引物浓度及酶量来构建LAMP检测体系，测试试剂盒能检测到的pUC57-Linc00853质粒最低浓度及其Tt值。
10.权利要求1～8任一项所述的基于LAMP用于肝癌初筛和预后的检测试剂盒的在制备早期肝癌、肝硬化预警和筛查的制剂中的用途。
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