[发明专利]一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法及其应用

权利要求书

1.一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，过程如下：

(1)种子液培养：

将菌株FL-2423接种于种子培养基中摇床培养，培养温度为26-32℃，培养时间为16-30小时，得种子液；

其中，种子培养基的组分及含量：味精20-50g/L，磷酸氢二钾5-15g/L，磷酸二氢钾1-5g/L，硫酸镁0.2-1g/L，硫酸锰0-0.05g/L，酵母粉1-10g/L，氯化钠20-60g/L，pH值在7.0；

(2)有氧发酵的胞内产依克多因发酵液：

将步骤(1)的种子液以5-10％的接种量(体积比)接种于发酵培养基中，于25-30℃的温度条件下培养24-96小时，得到胞内产依克多因的发酵液；

其中，发酵培养基的组分包括碳源、无机盐和氮源，谷氨酸钠为唯一碳源；无机盐中包含氯化钠，发酵培养基中，氯化钠的浓度为：50-100g/L，胞内合成依克多因，发酵产率达到10-16g/L。

2.如权利要求1所述的小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，菌株FL-2423为将该嗜盐菌菌株通过化学、物理复合诱变育种后，并经筛选后获得。

3.如权利要求2所述的小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，所述嗜盐菌菌株分离自日照沿海海泥中。

4.如权利要求3所述的小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，嗜盐菌菌株的分离及培养过程为：将采集于日照沿海海域的海泥样品于无菌水中进行稀释，稀释液涂布于含不同NaCl浓度的培养基平板上，28℃培养，待菌落长出后挑选单菌落，继续分离纯化，直至获得纯菌，初筛生长速度快，适应盐浓度范围广的菌株，复筛利用HPLC法测定依克多因产量，通过实验室筛选得到依克多因产量为2.4g/L的菌株。

5.如权利要求1所述的小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，种子培养基组分及含量为：味精25g/L，磷酸氢二钾5g/L，磷酸二氢钾3g/L，硫酸镁0.4g/L，硫酸锰0.01g/L，酵母粉1g/L，氯化钠30g/L，pH值在7.0。

6.如权利要求1所述的小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，发酵培养基中的无机盐还包括磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的组合或者包括硫酸镁、硫酸锰和硫酸铵的组合；氮源为酵母粉或者蛋白胨中的一种。

7.如权利要求1-6任一项所述的依克多因的应用，其特征在于，具体为含有依克多因组合物的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，组合物包括多元醇、透明质酸钠、依克多因和泛醇。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，组合物中各组分的重量百分比为：透明质酸钠0.4％、依克多因0.5％、泛醇2％，余量为多元醇。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，组合物的制备方法为：常温下，在多元醇里加入0.4％透明质酸钠，搅拌分散均匀，升温至85℃，保温搅拌溶解均匀；然后冷却至38℃，继续加入0.5％依克多因和2％泛醇，搅拌溶解完全，得到组合物。