[发明专利]壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法

权利要求书

1.一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)首先将卡利比克毕赤酵母接种于NYDB培养基中进行第一次活化培养，得到培养液；然后吸取培养液，按照体积比为1％-2％的接种量再次转接入NYDB培养基中进行第二次活化培养，得到酵母培养液经离心后得到菌泥，用无菌生理盐水离心洗涤，洗涤后的菌泥用无菌生理盐水重新悬浮得到悬浮液；同样用无菌生理盐水溶解壳寡糖，得到壳寡糖溶液；然后将壳寡糖溶液与悬浮液混合得到含壳寡糖的卡利比克毕赤酵母菌悬液；所述含壳寡糖的卡利比克毕赤酵母菌悬液中壳寡糖的终浓度为2000～3000μg/mL；

(2)选取无病害、无机械损伤、色泽均一、大小均匀的番茄，进行表明消毒处理，然后用清水冲洗，清洗后的番茄放入已消毒的塑料筐中晾干；在晾干后的番茄表面打孔，形成一定大小和深度的伤口，每个伤口处加入等量的步骤(1)制备的含壳寡糖的卡利比克毕赤酵母菌悬液，静置一段时间后再接种与卡利比克毕赤酵母菌悬液等体积的链格孢孢子悬浮液，自然晾干后用保鲜膜将其密封，并放置于恒温恒湿培养箱中培养，实现番茄采后黑斑病的控制；

或者选取无病害、无机械损伤、色泽均一、大小相近的番茄，不经任何消毒处理，保持番茄的自然状况，在番茄表面均匀喷洒步骤(1)制备的含壳寡糖的卡利比克毕赤酵母菌悬液，自然晾干后用保鲜膜密封塑料筐，置于恒温恒湿培养箱中贮藏，即可实现番茄采后病害的防治及贮藏保鲜的用途。

2.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的NYDB培养基，以1L计为：酵母膏5g，葡萄糖10g，牛肉浸膏8g，蒸馏水定容至1000mL，pH自然，115℃灭菌20min。

3.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(1)中所述离心的条件均为：4℃，8000rpm，时间10～15min。

4.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(1)中所述第一次活化培养和第二次活化培养的条件均为：温度28℃，时间20～24h。

5.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(1)中所述含壳寡糖的卡利比克毕赤酵母菌悬液中壳寡糖的终浓度为2000μg/mL，酵母浓度为1×10⁸cells/mL。

6.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(2)中所述番茄消毒处理的操作为：将番茄浸入含2％次氯酸钠溶液的水溶液中消毒1～3min；所述塑料筐消毒为清洗干净后晾干，再用75％酒精均匀喷洒消毒。

7.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(2)中所述打孔的孔径为4mm，深度为4mm。

8.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(2)中每个伤口处加入含壳寡糖的卡利比克毕赤酵母菌悬液和链格孢孢子悬浮液均为15μL；所述静置一段时间为2h；所述链格孢孢子悬浮液中孢子浓度为5×10⁴spores/mL。

9.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(2)中在恒温恒湿培养箱中培养的温度为20℃，相对湿度90％。

10.根据权利要求1所述的一种壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法，其特征在于，步骤(2)中所述在番茄表面均匀喷洒含壳寡糖的卡利比克毕赤酵母菌悬液，具体用量为每个番茄喷洒1-1.5mL溶液。