[发明专利]壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法

说明书

本发明属于采后病害生物防治技术领域，具体涉及壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法；步骤为：将卡利比克毕赤酵母进行活化培养，经培养后离心得到菌体，使用无菌生理盐水配制含壳寡糖终浓度为2000‑3000μg/mL的酵母菌悬液；在番茄表面打孔后将其注入，然后再注入等体积的链格孢菌孢子菌悬液，实现对链格孢菌孢子引发黑斑病的有效控制；或者将含壳寡糖的酵母菌悬液均匀喷洒在番茄表面，自然晾干，即可实现对番茄采后病害防治和贮藏保鲜的用途；本发明可显著减少番茄采后黑斑病的发生，降低番茄采后自然腐烂率，并且安全环保，对采后番茄主要品质指标无显著不良影响，取得了显著的技术效果，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于采后病害生物防治技术领域，具体涉及壳寡糖结合卡利比克毕赤酵母防治番茄采后病害及贮藏保鲜的方法。

背景技术

番茄也叫西红柿，其色泽艳丽、酸甜可口，肉厚汁多，含有丰富的维生素、糖类、有机酸和微量元素等；此外，还具有凉血平肝、清热解毒、降低血压等功效；既可作为水果生食，又可烹成鲜美之肴，广受消费者的青睐。

番茄是典型的呼吸跃变型果实，在采后贮藏、运输以及销售过程中易受到病原真菌侵染而腐烂变质，从而造成巨大的经济损失。其中链格孢(Alternaria alternata)引起的黑斑病是采后番茄常见的真菌性病害之一，严重影响番茄的品质。因此，采取安全、有效的措施控制番茄采后病害是十分必要的。

目前控制果蔬采后病害的方法主要有物理方法、化学方法和生物防治法。物理方法包括热处理、短波紫外线照射、电离辐射、冷藏、气调贮藏等，具有安全、无毒、无害的优点，但是对设备要求较高，且处理不当易对果蔬的感官品质造成不良影响。化学方法通常是采用化学杀菌剂来控制果蔬采后病害，该方法成本低，见效快且操作简单，但病原菌易产生耐药性，且易残留而对食用者健康造成危害，而且容易造成环境污染。生物防治法是利用拮抗微生物来抑制病原菌的生长。相比于物理方法和化学方法，生物防治法具有安全无毒、绿色环保等优点。

目前发现的拮抗微生物有酵母菌、细菌和霉菌，其中酵母菌具有快速增殖、遗传稳定、不产生抗生素、不产生真菌毒素、安全性高等优点，成为研究的热点。但酵母菌单独使用往往达不到化学杀菌剂的效果，因此常将拮抗酵母与物理方法、其他拮抗菌、化学添加物等结合使用来提高其防治效果。赵妍等人的研究表明，热空气处理结合季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)能够提高樱桃番茄自身的抗性，减少樱桃番茄采后病害。宋聪报道假丝酵母属(Candida sp.)和柠檬形克勒克酵母(Kloeckera apiculata)等体积混合用于防治柑橘青霉病。

将拮抗酵母与物理方法、其他拮抗菌、化学添加物等结合使用，能够提高其防治效果，但是效果方面还需进一步提高；另一方面化学添加剂虽然可以提高生防效果，但是不可避免的也会带来安全问题，所以研究一种安全有效的生物防治方法是十分必要的。

壳寡糖(Chitosan oligosaccharide，OCH)又称壳聚寡糖、低聚壳聚糖，是一类由N-乙酰氨基葡萄糖或氨基葡萄糖通过β-1,4-糖苷键连接起来的水溶性的氨基葡聚糖，是自然界中唯一带正电荷、阳离子碱性氨基低聚糖。OCH具有分子量低、水溶性好、生物活性高等优势，是性能优良的天然食品防腐保鲜剂。而且在生物防治领域，尤其是在番茄采后病害的生物防治方面，目前未见有相关的研究报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明旨在解决所述问题之一。本发明的目的是将OCH与卡利比克毕赤酵母(Pichia caribbica)创造性的结合应用于番茄采后病害的防治和番茄的贮藏保鲜，可有效控制番茄采后病害的发生，减少采后病害造成的损失；经研究证明，OCH结合卡利比克毕赤酵母能显著减少番茄采后黑斑病的发生，降低番茄采后自然腐烂，对番茄品质无显著不良影响，且可以缓减其品质劣变，达到番茄贮藏保鲜的目的。达到了意想不到的显著效果，具有潜在的应用价值。

为实现以上目的，本发明提供方案如下：