[发明专利]靶向STAT3蛋白Ser701磷酸化的抗原肽、抗体及其应用

权利要求书

1.一种分离的抗原肽，所述抗原肽具有靶向STAT3蛋白的Ser701磷酸化位点的免疫原性，其中，所述抗原肽为(I)～(IV)中的至少一项：

(I)SEQ ID NO.1～4所示的氨基酸序列；

(II)与(I)所述序列至少有75％相似性的氨基酸序列；

(III)具有与(I)或(II)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个氨基酸序列获得的氨基酸序列，且与(I)或(II)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列；

(IV)(I)、(II)或(III)所述抗原肽或在其氨基酸序列中的部分或全部氨基酸残基处被修饰。

2.一种抗原构建体，所述抗原构建体包含权利要求1所述的抗原肽及用于负载或偶联权利要求1所述的抗原肽的载体。

3.根据权利要求2所述的抗原构建体，其中，所述载体是脂质体。

4.根据权利要求2所述的抗原构建体，其中，所述载体选自匙孔槭血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵白蛋白(OVA)、牛甲状腺球蛋白(THY)、灭活百日咳毒素、B群脑膜炎球菌外膜蛋白、绿脓杆菌外毒素A、霍乱毒素B亚单位、细菌外膜蛋白、大肠杆菌热敏感肠毒素、肺炎球菌溶血素、淋球菌菌毛蛋白和革兰氏阴性菌的脂多糖中的一种。

5.权利要求1所述的抗原肽、权利要求2所述的抗原构建体的应用，所述应用包括如下至少一项：

(1)用作制备STAT3蛋白的Ser701磷酸化特异性抗体；

(2)用作制备STAT3蛋白的Ser701磷酸化相关疾病的疫苗；

(3)用作免疫激活剂。

6.一种抗体，所述抗体与权利要求1所述的抗原肽、或权利要求2～4任一所述的抗原构建体进行特异性结合。

7.权利要求6所述抗体的制备方法，包括将权利要求1所述的抗原肽、权利要求2所述的抗原构建体进行动物免疫，收集抗血清和纯化的步骤。

8.一种ELISA试剂盒，用于检测STAT3蛋白Ser701磷酸化水平，所述ELISA试剂盒包括权利要求6所述的抗体或权利要求7所述的制备方法得到的抗体。

9.如权利要求8所述的ELISA试剂盒，其包含：包被有STAT3蛋白Ser701磷酸化抗体的酶标板和洗涤缓冲液、封闭液、包被缓冲液、酶标抗体、TMB显色液、终止液；

优选地，所述ELISA试剂盒包含：

如权利要求6所述的抗体或权利要求7所述的制备方法得到抗体；

酶标抗体；

洗涤缓冲液：为PBST缓冲液：1000mL 0.01mol/L PBS+0.5mL Tween-20；

封闭液：含有5％脱脂奶粉PBS缓冲液；

包被缓冲液：包含0.015M Na₂CO₃和0.035M NaHCO₃，pH 9.6；

TMB母液：为10mg TMB充分溶于5mL无水乙醇制得；

TMB显色液：包含0.5mL TMB母液、10mL底物缓冲液和2.1μL 30％质量百分比的H₂O₂水溶液；以及

终止液：2M的H₂SO₄。

10.一种药物组合物，包括权利要求6所述的抗体或权利要求7所述的制备方法制得的抗体，以及药学上可接受的辅料或者载体。