[发明专利]一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法

权利要求书

1.一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1)将猪皮浸泡在生理盐水中，浸泡后的猪皮的表面用棉布擦干，揭除凝胶贴上的防粘膜后粘贴在擦干后的猪皮的表面上，在Franz扩散池中进行透皮试验；

其中，透皮介质为生理盐水；透皮介质的体积为14.5～15.5ml；透皮介质的温度为30～35℃；转速为200～1000rpm；取样时间为6h；

(2)将透皮试验后的猪皮，加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，在5000～7000rpm的条件下进行匀浆处理，所得混悬液加入甲醇稀释后，离心，取上清液过滤，取续滤液作为皮内滞留透皮试验的供试品溶液；

(3)将步骤(2)中所得供试品溶液，采用高效液相色谱方法进行测定，其中，色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶；采用流动相A和流动相B为混合流动相进行等度洗脱，流动相A和流动相B的比例为30～40:70～60；所述流动相A为1～5％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.0～6.0；所述流动相B为甲醇。

2.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(2)中，浸泡时的温度为70℃。

3.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(2)中，浸泡时的时间为1～3h；优选为2h。

4.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(2)中，氢氧化钠溶液的浓度0.05～0.15M，优选为0.1M；匀浆处理时的转速为6000rpm。

5.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(1)中，在生理盐水中浸泡的时间为20～40分钟；优选为30分钟。

6.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(1)中，透皮介质的体积为14.5ml；透皮介质的温度为32℃；转速为500rpm。

7.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述色谱柱为Inertsustion C18；优选地，色谱柱的长度为250mm，直径为4.6mm，填料粒径为5μm。

8.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述流动相A为3％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.5。

9.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(3)中，等度洗脱时，流动相A和流动相B的比例为35:65。

10.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述色谱条件包括：流速为0.8～1.5mL/min，优选为1mL/min；进样量为10～50μl，优选为20μl；检测波长为225～235nm；优选为230nm。