[发明专利]一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法

说明书

本发明涉及一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，具体包括如下步骤：(1)揭除利多卡因凝胶贴上的防粘膜后粘贴在猪皮的表面，在Franz扩散池中进行透皮试验；(2)将透皮试验后的猪皮，加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，进行匀浆处理，稀释，离心，取上清液过滤，取续滤液作为供试品溶液；(3)采用高效液相色谱方法测定供试品溶液的皮内滞留量。采用本发明的方法处理猪皮，能够有效将猪皮中滞留的利多卡因提取出来，处理后的猪皮呈现完全溶解状态，具有肉眼可见的优势，主成分利多卡因稳定性好，采用高效液相色谱方法进行测定皮内滞留透皮试验时，皮内滞留量偏高，测试结果更加准确。

技术领域

本发明属于药物分析方法技术领域，具体涉及一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法。

背景技术

利多卡因凝胶贴为局部外用药，作用部位在角质层内的外用制剂，在药学主要质量特性及制剂微观结构一致的基础上，我们可通过体外释放和体外透皮吸收对比试验来评价自制药和参比制剂的疗效的一致性，需开展体外透皮研究。体外透皮为模拟药品在生理条件下的透皮过程，以部分地反应药品质量与临床治疗的有效性。

发明内容

本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法。

本发明的技术方案如下：

一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1)将猪皮浸泡在生理盐水中，浸泡后的猪皮的表面用棉布擦干，揭除凝胶贴上的防粘膜后粘贴在擦干后的猪皮的表面上，在Franz扩散池中进行透皮试验；

其中，透皮介质为生理盐水；透皮介质的体积为14.5～15.5ml；透皮介质的温度为30～35℃；转速为200～1000rpm；取样时间为6h；

(2)将透皮试验后的猪皮，加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，在5000～7000rpm的条件下进行匀浆处理，所得混悬液加入甲醇稀释后，离心，取上清液过滤，取续滤液作为皮内滞留透皮试验的供试品溶液；

(3)将步骤(2)中所得供试品溶液，采用高效液相色谱方法进行测定，其中，色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶；采用流动相A和流动相B为混合流动相进行等度洗脱，流动相A和流动相B的比例为30～40:70～60；所述流动相A为1～5％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.0～6.0；所述流动相B为甲醇。

对于本发明而言，需要对透皮试验后的猪皮进行处理，具体处理过程如下：将透皮试验后的猪皮加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，在5000～7000rpm的条件下进行匀浆处理，处理后的猪皮在匀浆处理的过程中容易被打碎，主成分利多卡因容易被提取出来，采用高效液相色谱方法进行测定皮内滞留透皮试验时，皮内滞留量偏高，测试结果更加准确。

在相同的条件下，采用其他方式处理，例如，将透皮试验后的猪皮直接进行匀浆处理、不加人氢氧化钠，仅仅加入水中在65～75℃的温度下浸泡以及加入甲醇进行匀浆处理时，处理后的猪皮在匀浆处理的过程中均难以被打碎，主成分利多卡因不易被提取出来，采用高效液相色谱方法进行测定皮内滞留透皮试验时，皮内滞留量偏低，准确率偏低。

在本发明中，在步骤(2)中，浸泡时的温度为65～75℃，可以但不局限于65℃、68℃、70℃、72℃或75℃，为了获得更好的提取效果，浸泡时的温度为70℃。

在一种优选方案中，浸泡时的时间为1～3h，优选为2h。

进一步地，浸泡时，氢氧化钠溶液的浓度0.05～0.15M为，优选为0.1M。

浸泡后，进行匀浆处理的过程中，转速为5000～7000rpm，可以但不局限于5000rpm、6000rpm或7000rpm。