[发明专利]基于气相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱进行畜禽肉中风味化合物差异鉴别的方法

权利要求书

1. 一种基于气相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱进行牛肉或羊肉真伪鉴别的方法，包括如下步骤：

1）分离

将待测畜禽肉样本进行研磨处理，得到的切碎的样品；

2）顶空固相微萃取

将所述切碎的样品进行顶空固相微萃取，得到混合未知化合物；

3）鉴定

将萃取得到的混合未知化合物进行气相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱，得到GC-MS数据；

所述GC-MS数据通过NIST和homeflavor库中的MS模式、保留指数和HRF处理识别，得到所述待测畜禽肉样本所含的化合物成分；

4）统计分析

对3）中得到的化合物成分进行统计分析，得到所述待测畜禽肉样本对应的风味化合物；

5）将所述待测畜禽肉样本对应的风味化合物与已知牛肉或羊肉样本的风味化合物对比差异化合物的丰度倍数；

当进行牛肉真伪鉴别时，所述待测畜禽肉样本对应的风味化合物与已知牛肉样本的风味化合物对比如下A1)-H1)差异化合物，当所述差异化合物的丰度倍数满足如下范围，且p值均小于0.01时，则所述待测畜禽肉样本可能为鸭肉，结果判定为所述待测畜禽肉样本不是牛肉和/或不是纯牛肉：

A1) 2E,4E-癸二烯醛 19.20~27.32；

B1) 2E-庚烯醛 6.91~9.77；

C1) 2-戊基呋喃 3.67~5.28；

D1) 1-辛烯-3-醇 4.34~6.36；

E1) 2-正辛基呋喃 17.41~25.62；

F1) 1-辛烯-3-酮 2.92~4.38；

G1) 2-正丁基呋喃 2.92~4.38；

H1) 2E,4E-壬二烯醛 7.16~10.37；

当进行羊肉真伪鉴别时，所述待测畜禽肉样本对应的风味化合物与已知羊肉样本的风味化合物对比如下A2)-F2)差异化合物，当所述差异化合物的丰度倍数满足如下范围时，则所述待测畜禽肉样本可能为鸭肉，结果判定为所述待测畜禽肉样本不是羊肉和/或不是纯羊肉：

A2) 2-戊基呋喃 1.74~2.60；

B2) 2-正丁基呋喃 2.10~3.16；

C2) 2-正辛基呋喃 5.50~7.96

D2) 1-辛烯-3-醇 1.86~2.78；

E2) 2E,4E-癸二烯醛 11~16.5；

F2) 2E,4E-壬二烯醛 6.36~9.37。

2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述待测畜禽肉样本的处理如下：将待测畜禽肉去筋膜，搅碎，放入蒸煮袋，并在80°C 的水浴中蒸煮 30 分钟，冷却后在液氮中研磨，备用；

所述顶空固相微萃取的流程如下：所述切碎的样品加入2-甲基-3庚酮溶液，装入PTFE-硅胶隔膜的磁性盖密封的容器中40~60 ^oC孵育10~30min，然后使用纤维头萃取，萃取纤维在进样口解吸附，在连续分析之间，萃取纤维在后进样口下老化；

所述纤维头萃取的温度为37~65^oC，时间为10~59min；

进样口中解吸附的温度为230~270 ^oC，时间为1~8min；

后进样口老化的温度为230~270℃，时间为10~30min；

所述气相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱的工作条件如下：

自动进样器：TriPlus RSH；

质量分析仪：Trace 1310 GC的 Q-Exactive Orbitrap；

膜厚：内径 60 m × 0.25 mm × 0.25 μm；

色谱柱：VF-WAX ms；

恒定流速为 1 mL/min的氦气作为载气；

程序升温条件为：40°C保持2 分钟，然后以 4°C/分钟的速率升温至 230°C，保持 5 分钟；

传输线 1 和传输线 2 均设置为 250 °C；

电离方式：电子轰击电离70 eV；

扫描方式：全扫描；

分辨率：60,000 FWHM ；

扫描范围：30 - 400 m/z，自动增益控制目标值为1E6；

MS离子源和传输线温度分别设置为 280 °C 和 250 °C；

通过主成分分析、t 检验和偏最小二乘判别分析PLS-DA分析检验所述统计分析。