[发明专利]一种替换PgsB来源的γ-PGA合成酶的基因簇及其合成聚谷氨酸的方法

权利要求书

1.一种γ-PGA合成酶的基因簇pgsB′CA，其特征在于，所述基因簇pgsB′CA中的合成酶基因pgsA′的序列为如SEQ ID NO.4-SEQ ID NO.6所示的其中任意一种。

2.根据权利要求1所述的γ-PGA合成酶的基因簇pgsB′CA，其特征在于，所述合成酶基因pgsB′来源于枯草芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌其中任意一种。

3.根据权利要求1所述的γ-PGA合成酶的基因簇pgsB′CA，其特征在于，所述合成酶基因pgsB、pgsC来源于地衣芽孢杆菌的γ-PGA合成酶的基因簇pgsBCA。

4.一种重组质粒，根据权利要求1-3任一所述的基因簇pgsB′CA构建。

5.一种聚合酶基因重组菌株，根据权利要求4所述的重组质粒转化构建。

6.根据权利要求5所述的重组菌株，其特征在于，以C.glutamicum F343为底盘。

7.一种合成聚谷氨酸的方法，其特征在于，利用权利要求5所述的重组菌株发酵培养。

8.一种替换PgsA来源提高聚谷氨酸产量的方法，其特征在于，以C.glutamicum F343为底盘，异源表达如权利要求1-3任一所述的γ-PGA合成酶的基因簇pgsB′CA，将得到的重组菌株发酵培养。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述的重组菌株发酵培养的步骤为：将所述重组菌株的种子液接种至发酵培养基，先于32±2℃培养1～2h，加入IPTG诱导1～2h，最后于37±2℃培养48±5h。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养基包括：玉米浆10g·L^-1，葡萄糖120g·L^-1，K₂HPO₄ 1.0g·L^-1，MgSO₄ 0.6g·L^-1，FeSO₄·7H₂O 0.002g·L^-1，MnCl₂·4H₂O 0.002g·L^-1，尿素7.0g·L^-1，pH 6.8-7.0。