[发明专利]一种十足目虹彩病毒1的单域抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种十足目虹彩病毒1的单域抗体，其特征在于：所述单域抗体的氨基酸序列如SEQID NO:1或SEQ ID NO:2所示。

2.根据权利要求1所述的单域抗体，其特征在于：所述单域抗体的基因序列如SEQ IDNO:3或SEQ ID NO:4所示。

3.一种如权利要求2所述的十足目虹彩病毒1的单域抗体的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)以成年健康的条纹斑竹鲨作为免疫对象，采用DIV1为抗原进行免疫；

(2)完成免疫后，分离免疫鲨鱼外周血淋巴细胞，提取总RNA，反转录为cDNA；以cDNA为模板，扩增条纹斑竹鲨vNAR片段，将vNAR基因片段与载体进行酶接后构建噬菌体文库；

(3)利用噬菌体展示技术，从文库中淘选识别DIV1的阳性克隆：通过对噬菌体文库进行淘筛、富集和鉴定，获得2株单域抗体，命名为十足目虹彩病毒1的单域抗体D02和D13；通过测序，获得D02和D13抗体的基因序列；

(4)构建表达载体，诱导表达DIV1单域抗体：将D02和D13的基因序列克隆到PET30a上，获得表达载体，将表达载体转化至E.coli Shuffle T7菌株，扩大培养后，加入IPTG诱导表达，收集纯化抗体蛋白。

4.一种如权利要求1所述的十足目虹彩病毒1的单域抗体在检测十足目虹彩病毒1中的应用。