[发明专利]一种枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中杂质的分离检测方法

说明书

本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种同时分离并检测枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中多种杂质的方法，采用所述方法对枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸进行高效液相色谱检测，可以同时准确分离并定量检测枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中四种已知杂质，所述方法的专属性强，并且检测限和定量限低，具有良好的分离度。

发明领域

本发明涉及药物检测技术领域，具体涉及一种同时分离并测定枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中多种杂质的方法。

发明背景

枸橼酸爱地那非作为枸橼酸西地那非的新型衍生物，是一种5型磷酸二酯酶(Phosphodieseterase 5，PDE5)抑制剂，用于治疗男性勃起功能障碍(ErectileDysfunction，ED)。其化学名为：1-〔3-(6，7-二氢-1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)-4-乙氧基苯磺酰基〕-顺式-3,5-二甲基哌嗪枸橼酸盐(C₂₃H₃₂N₆O₄S·C₆H₈O₇)，其结构式为：

有关物质(杂质)及其含量是反映药品纯度的直接指标，控制/降低有关物质数量及其含量是药品质量研究的关键内容。在枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中，目前已知的主要杂质为杂质17：邻羟基苯甲酸；杂质3：对乙氧基苯甲酸；杂质4：间乙氧基苯甲酸；杂质2：邻乙氧基苯甲酸乙酯，来自于工艺杂质、降解产物等，结构式如下：

通过检索国内外文献及专利，仅检索到：

专利1：CN 112198243 A公开了一种枸橼酸西地那非有关物质的检测方法，该方法采用超高效液相色谱方法进行检测，以缓冲液-甲醇-乙腈为流动相，所述缓冲液pH为5.5～6.8，可快速对枸橼酸西地那非7种已知的主要杂质A、B、C、D、E、F、G进行分离检测，缩短检测时间。7种已知杂质分别为：

专利2：CN 114062534 A通过高效液相色谱-质谱串联方法，实现对枸橼酸爱地那非原料药中的遗传毒性杂质4-氨基-1-甲基-3-正丙基吡唑-5-甲酰胺(SM3)超高灵敏度的检测方法，其中液相条件采用：Agilent Zorbax SB phenyl(4.6mm×75mm，3.5μm)色谱柱，流动相为0.01％甲酸水溶液-甲醇(40：60)，质谱条件采用正离子MRM检测模式。采用上述条件对枸橼酸爱地那非原料药中的遗传毒性杂质SM3进行检测。

以上两项专利介绍了枸橼酸西地那非杂质和衍生物枸橼酸爱地那非遗传毒性杂质的分离检测方法，并未涉及到枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中的4种已知杂质的分离检测方法，无法准确控制邻乙氧基苯甲酸的质量。

发明内容

针对现有技术中存在的缺陷与不足，本发明的第一方面建立了一种对枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中的四种已知杂质进行分离和检测的高效液相色谱方法，使最终成品枸橼酸爱地那非药品安全、有效且质量可控。

本发明方法同时测定4种已知杂质，包括杂质17：邻羟基苯甲酸；杂质3：对乙氧基苯甲酸；杂质4：间乙氧基苯甲酸；杂质2：邻乙氧基苯甲酸乙酯；同时对邻乙氧基苯甲酸中3种已知杂质，包括杂质17(邻羟基苯甲酸)、杂质3(对乙氧基苯甲酸)和杂质4(间乙氧基苯甲酸)进行了前端质量控制。

本发明方法分离效果显著(分离度大于1.5)、专属性强、灵敏度显著提升(最低定量限为0.28μg/mL，最低检测限低至0.08μg/mL)、回收率接近100％、测定准确度显著提高，测定范围广、可重复性和中间精密度优异、耐用性良好能够对邻乙氧基苯甲酸中的杂质进行准确定量测定。