[发明专利]可用于检测与甲基苯丙胺成瘾相关的微小RNA的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于甲基苯丙胺辅助诊断的检测试剂盒，其特征在于：包括用于检测血浆及其外泌体中hsa-miR-320的hsa-miR-320a-3p、hsa-miR-320b及hsa-miR-320c的联合试剂；

其中hsa-miR-320a-3p在基因组上的定位为：chr8:22244966-22245037；

hsa-miR-320b在基因组上的定位为：

chr1:224257040-224257110/chr1:116671746-116671817；

hsa-miR-320c在基因组上的定位为：

chr18:21683518-21683589/chr18:24321675-24321746；

并且，

hsa-miR-320a-3p的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示：AAAAGCUGGGUUGAGAGGGCGA；所述hsa-miR-320a-3p在甲基苯丙胺患者血浆及其外泌体中显著上调；

hsa-miR-320b的核苷酸序列为SEQ ID NO：2所示：AAAAGCUGGGUUGAGAGGGCAA；所述hsa-miR-320b在甲基苯丙胺患者血浆及其外泌体中显著上调；

hsa-miR-320c的核苷酸序列为SEQ ID NO：3所示：

AAAAGCUGGGUUGAGAGGGU；所述hsa-miR-320c在甲基苯丙胺患者血浆及其外泌体中显著上调；

将hsa-miR-320a-3p、hsa-miR-320b及hsa-miR-320c一起联合检测出的引物为：

P1：5’-GGGGGAAAGCTGGGTTG-3’；

P2：5’-GTGCGTGTCGTGGAGTCG-3’。

2.根据权利要求1所述的用于甲基苯丙胺辅助诊断的检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括有hsa-miR-320a-3p、hsa-miR-320b及hsa-miR-320c的逆转录引物序列，其中，

所述hsa-miR-320a-3p特异的逆转录引物为SEQ ID NO：4所示：

5’GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACTCGCCCT3’；

所述hsa-miR-320b特异的逆转录引物为SEQ ID NO：5所示：

5’GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACTTGCCC3’；

所述hsa-miR-320c特异的逆转录引物为SEQ ID NO：6所示：

5’GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACACCCTC3’。

3.根据权利要求1或2所述的用于甲基苯丙胺辅助诊断的检测试剂盒，其特征在于：还包括有用于检测血浆中外泌体的hsa-miR-320的hsa-miR-320a-3p、hsa-miR-320b及hsa-miR-320c所需内参基因hsa-miR-423-5p的特异性引物为：

P3：5’-TGAGGGGCAGAGAGCGA-3’；

P4：5’-GTGCGTGTCGTGGAGTCG-3’。

4.根据权利要求1或2所述的用于甲基苯丙胺辅助诊断的检测试剂盒，其特征在于：还包括有用于检测血浆中hsa-miR-320的hsa-miR-320a-3p、hsa-miR-320b及hsa-miR-320c所需的看家基因Cel-miR-39-3p的特异性引物为：5’-UCACCGGGUGUAAAUCAGCUUG-3’。