[发明专利]评价食用植物油安全的快速检测试剂盒、制备方法及其应用

权利要求书

1.评价食用植物油安全性的时间分辨荧光试剂盒，其特征在于：包括荧光试纸条和含有铕标记的抗苯并[a]芘单克隆抗体、铕标记的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体、铕标记的抗辣椒素类物质通用单克隆抗体的样品反应瓶，荧光试纸条的一面从上至下依次为吸水垫、检测垫和样品垫，相邻各垫于连接处交叠相接，所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜设有横向质控线和检测线，质控线包被有兔抗鼠多克隆抗体，检测线位于质控线下方，个数为两条或三条，呈间隔分布，每条检测线上分别包被有一种待检物-蛋白偶联物，所述的待检物为苯并[a]芘、黄曲霉毒素B1、辣椒素类物质，所述待检物-蛋白偶联物为苯并[a]芘-卵清白蛋白偶联物(BAP-OVA)、黄曲霉毒素B1-卵清白蛋白偶联物(AFB1-OVA)、辣椒素类物质-卵清白蛋白偶联物(CAP-OVA)，所述质控线包被有兔抗鼠多克隆抗体；所述的抗苯并[a]芘单克隆抗体为由保藏编号为CCTCC NO:C201882的杂交瘤细胞株BBBE1H1分泌产生的。

2.根据权利要求1所述的评价食用植物油安全性的时间分辨荧光试剂盒，其特征在于：所述铕标记的抗苯并[a]芘单克隆抗体为通过表面修饰的羧基与抗苯并[a]芘单克隆抗体的氨基端偶联形成，制备方法为：将铕标记试剂加硼酸缓冲液超声，然后加EDC溶液，振荡混匀，离心，去上清，加硼酸缓冲液复溶，振荡混匀，加入抗苯并[a]芘单克隆抗体，摇床反应，离心去上清，封闭，分装冻干；

所述铕标记的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备方法如下：将铕标记试剂加硼酸缓冲液超声，然后加EDC溶液，振荡混匀，离心，去上清，加硼酸缓冲液复溶，振荡混匀，加入抗苯并[a]芘单克隆抗体，摇床反应，离心去上清，封闭，分装冻干；

所述铕标记的抗辣椒素类物质通用单克隆抗体的制备方法如下：将铕标记试剂加硼酸缓冲液超声，然后加EDC溶液，振荡混匀，离心，去上清，加硼酸缓冲液复溶，振荡混匀，加入抗苯并[a]芘单克隆抗体，摇床反应，离心去上清，封闭，分装冻干。

3.根据权利要求1所述的评价食用植物油安全性的时间分辨荧光试剂盒，其特征在于：所述时间分辨荧光免疫层析试纸条的检测线上苯并[a]芘-卵清白蛋白偶联物包被量为0.4～0.8μg/cm，黄曲霉毒素B1-卵清白蛋白偶联物的包被量为0.4～0.8μg/cm，辣椒素类物质-卵清白蛋白偶联物的包被量为0.8-1.0μg/cm；所述样品反应瓶中铕标记的抗苯并[a]芘单克隆抗体冻干品的含量为0.1-0.3μg，抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体冻干品的含量为0.15-0.4μg，抗辣椒素单克隆抗体冻干品的含量为0.2-0.4μg。

4.根据权利要求1所述的评价食用植物油安全性的时间分辨荧光试剂盒，其特征在于：抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体的IC50小于等于1.6ppb；抗辣椒素类物质通用单克隆抗体的IC50小于等于8.5ppb。

5.根据权利要求1所述的评价食用植物油安全性的时间分辨荧光试剂盒，其特征在于：还包括样品缓释液及样品缓释液吸管，所述的样品缓释液为含0.01％～0.30％吐温-20(v/v)、0.5～1.5％蔗糖(w/w)和0.1～1％牛血清蛋白(w/w)的PBS溶液。