[发明专利]血浆中提取游离DNA的方法

权利要求书

1.一种血浆中提取游离DNA的方法，其特征是，该方法的具体步骤为：

a、取血浆样本置于离心管内，然后在离心管内加入蛋白酶K和裂解液，并将离心管进行涡轮旋转或振荡混合均匀；

b、将混合均匀的裂解混合物进行水浴，得到初级混合液；

c、将初级混合液与结合液进行混合，再将离心管静置在磁力架上进行磁珠分离，并倒掉离心管内的废液，保留磁珠；

d、再在离心管内倒入浓度为75％-85％的乙醇，并将离心管内的乙醇和磁珠混合；

e、用漂洗液对磁珠进行清洗；

f、将洗脱液放入离心管内，然后将离心管置于磁力架上进行磁分离，最后将离心管内的上清液吸出，上清液即为游离DNA。

2.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：所述裂解液由如下重量份数的组分组成：盐酸胍3-5份、异硫氰酸胍0.8-2.5份、碘化钠1-3份、异丙醇10-20份、水2-5份。

3.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：所述结合液由如下重量份数的组分组成：盐酸胍7-13份、柠檬酸1-3份、异丙醇20-50份、乙酸1-4份、EDTA 5-8份。

4.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：所述漂洗液由如下重量份数的组分组成：异硫氰酸胍5-10份、碘化钠2-6份。

5.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：所述洗脱液由如下重量份数的组分组成：Tris-HCl 5-8份、EDTA 1-3份、三羟甲基氨基甲烷6-12份。

6.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：步骤a中，所述血浆样本与裂解液的比例为1：4，所述涡轮旋转的转速为8000-9500rpm。

7.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：步骤b中，所述水浴温度为55-60摄氏度，水浴时间为1-1.2小时。

8.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：步骤c中，所述初级混合液与结合液的混合方式为离心混合，离心转速为10000-12000rpm，离心时间为50秒。

9.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：步骤d中，所述乙醇和磁珠混合摇匀的混合方式为离心混合，离心转速为11000-13000rpm，离心时间为1分钟。

10.根据权利要求1所述的血浆中提取游离DNA的方法，其特征在于：步骤f中，所述离心管磁分离的时间为2-4分钟，上清液通过吸管吸出。