[发明专利]基于光化学实验的新污染物的光修饰毒性评估方法

说明书

本发明公开了一种基于光化学实验的新污染物的光修饰毒性评估方法，包括步骤：1、模拟日光对新污染物水溶液光照，收集不同光照时间的样品及未光照样品分别置于试管并冷藏；2、费氏弧菌冻干粉在4℃下复温，按0.2g:(1‑2mL)加入4℃复苏液，摇匀后于20±5℃下复苏，用NaCl溶液稀释；3、取若干个小管分别加入100μL费氏弧菌溶液，再取步骤1不同光照时间的样品及未光照样品各900μL并分别加入小管中得到检测样品，测量初始发光强度和15min后发光强度；4、计算步骤3各样品的发光抑制率R，以未光照样品的发光抑制率作为基准，不同光照时间的样品的发光抑制率与其进行比较，若后者高于基准，则代表新污染物具有光修饰毒性，具有评估流程简单、周期短的特点。

技术领域

本发明涉及环境毒性检测，具体是一种基于光化学实验的新污染物的光修饰毒性评估方法。

背景技术

我国作为化学品使用大国，每年都会有数千种新化学物质的产生，这些新化学物质进入环境中，势必会引发各种生态效应。

一些新型有机污染物暴露在太阳光或模拟日光下，可以通过光修饰作用产生光致毒性，光修饰毒性表现为有机化合物在光照条件下发生光化学反应，生成比自身毒性更大的光修饰产物。发光细菌是一种体内能够产生荧光酶，并且能够利用ATP产生光量子的细菌，有毒物质作用于细菌时会破坏其呼吸系统或遗传物质，造成发光细菌的发光强度增强或者减弱，因此通过对其发光强度变化的计算，可以表征待测物质的毒性大小，具有快速、灵敏等优点。

抗生素、内分泌干扰物、多环芳烃衍生物等新污染物在日光照射下均可发生光化学转化，但其是否具有光修饰毒性尚缺少有效的评估方法。因此，亟需开发一种基于光化学实验和发光细菌检测技术研究新污染物的光修饰毒性评估方法，从而反映新污染物光化学转化对水生生物的毒性效应和生态风险。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于光化学实验的新污染物的光修饰毒性评估方法，能够有效评估新污染物是否具有光修饰毒性，且具有评估流程简单、周期短的特点。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

一种基于光化学实验的新污染物的光修饰毒性评估方法，包括如下步骤：

(1)配制新污染物水溶液，利用模拟日光对新污染物水溶液进行光照，然后收集不同光照时间的样品及未光照样品分别置于试管中并避光冷藏；

(2)将费氏弧菌冻干粉在4℃下复温15min，按照费氏弧菌冻干粉与复苏液的比例0.2g：(1-2mL)向费氏弧菌冻干粉中加入4℃复苏液，并充分摇晃均匀后于20± 5℃的温度下平衡复苏，然后根据发光强度测量仪的量程用浓度为20g/L的NaCl溶液稀释费氏弧菌，最后检测费氏弧菌溶液的初始发光强度确保其在发光强度测量仪的量程范围内；

(3)先取若干个干净的小管并分别加入100μL费氏弧菌溶液，再取步骤(1)避光冷藏的不同光照时间的样品及未光照样品各900μL并分别加入装有费氏弧菌溶液的小管中得到检测样品，然后利用发光细菌毒性检测仪测量检测样品的初始发光强度，记为I₀，15min后再次测量检测样品的发光强度，记为I₁₅；

(4)计算步骤(3)各样品的发光抑制率R，公式如下：

以未光照样品的发光抑制率作为基准，将不同光照时间的样品的发光抑制率与其进行比较，若不同光照时间的样品发光抑制率高于基准，则代表新污染物具有光修饰毒性。

进一步地，所述步骤(1)中利用氙灯或汞灯模拟日光，且截止波长λ290nm。

进一步地，所述步骤(2)平衡复苏的时间为15min。

进一步地，所述步骤(3)检测样品的pH值为6.0-8.5。