[发明专利]少根根霉AS7-34及其在提取当归多糖中的应用

说明书

本发明公开了一种少根根霉AS7‑34及其在提取当归多糖中的应用，少根根霉(Rhizopus arrhizus)AS7‑34，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No:62601，保藏日期2022年7月6日。本发明在从当归中提取多糖前，增加了微生物菌株少根根霉AS7‑34发酵预处理，之后，当归粉加水保温酶解，细胞壁中的纤维素、半纤维素和木质素等物质被水解，有助于当归可溶性多糖在超声水提时溶出，从而能够显著提高多糖的提取得率。较不采用发酵预处理的常规方法相比，当归多糖的提取得率可以提高43.7％。

(一)技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一株少根根霉AS7-34及其在提取当归多糖中的应用。

(二)背景技术

中药材当归(Angelicae Sinensis Radix)是伞形科(Apiaceae)多年生草本植物当归(Angelica sinensis)的干燥根。当归是一味常用的传统中药，其性温，味甘、辛，具有补血、活血、调经止痛、润肠通便、扶正固本之功效。当归含有多种活性成分，包括藁本内酯、阿魏酸、当归多糖、查耳酮和倍半萜烯等。近年来的药理学研究表明，当归多糖具有丰富的生物活性，通过激活补体，对机体免疫系统、造血系统发挥作用，还具有抗肿瘤、抗放射性损伤和促进胃溃疡愈合等活性，中成药“归芪口服液”和“归芪颗粒”的主要成分之一就是当归多糖。因此，当归多糖在医疗和保健食品行业具有广阔的应用前景。

目前，关于当归多糖提取方法有较多研究报道，基本的方法都是热水提取乙醇沉淀法(简称为“水提醇沉法”)，在此基础之上，又有用微波、超声波、酶解等辅助提取。不同提取方法有各自的优缺点。例如，传统的水提醇沉法操作简单，但存在提取得率低、耗时长等缺点；微波辅助提取法提取时间短、效率高，但多糖的活性有所下降；超声辅助提取法设备要求低，不会显著增加提取成本，但对提高提取得率的效果不够显著；酶解辅助提取法能够显著提高提取得率，且条件温和，提取的多糖活性好，缺点是增加了酶的使用成本，提取过程耗时长。

近年来，酶解技术应用于植物活性成分的提取得到广泛应用，它是用纤维素酶、果胶酶或蛋白酶等，在适宜的条件下水解植物原料，使植物的细胞壁水解，从而有利于胞内活性成分在提取时释放。目前，纤维素酶是植物活性成分提取中应用最多的酶，植物的细胞壁构成包括纤维素、半纤维素、木质素和果胶等物质，单一使用纤维素酶往往难以达到非常理想的效果。为了提高酶解提取的效果，许多研究采用复合酶法，就是同时使用纤维素酶、果胶酶和蛋白酶等2种及2种以上的酶，虽然可以显著提高产物提取得率，但多种酶的使用无疑增加了提取成本。

微生物具有很强的产酶能力，特别是一些放线菌和霉菌，可以产生多种分解植物组织的水解酶，包括纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶、果胶酶和蛋白酶等。所以，如果利用某种微生物直接发酵植物原料，菌体在生长过程中产生的各种水解酶可以协同分解细胞壁成分，从而有利于细胞中的有效成分释放，提取得率便可以显著提高。

为了提高当归多糖的提取得率，本发明对传统的水提醇沉法提取方法进行改进，增加微生物发酵预处理步骤，可大幅度提高归多糖的提取得率。

(三)发明内容

本发明目的是提供一株新的微生物菌株—少根根霉(Rhizopus arrhizus)AS7-34及其在提取当归多糖中的应用，当归经该菌株发酵后，当归多糖的提取得率可以显著提高。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一株新的微生物菌株—少根根霉(Rhizopus arrhizus)AS7-34，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No:62601，保藏日期2022年7月6日，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；邮编510070。