[发明专利]重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc、构建方法和应用在审
申请号: | 202211101709.1 | 申请日: | 2022-09-09 |
公开(公告)号: | CN115873901A | 公开(公告)日: | 2023-03-31 |
发明(设计)人: | 程林峰;张芳琳;胡永亮;张亮;叶伟;马宏炜;刘赫;张莲青;强遵先 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军空军军医大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/40;A61K39/12;A61P31/14 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 崔瑞迎 |
地址: | 710032 陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 表达 载体 pvax lamp cchfv gc 构建 方法 应用 | ||
1.一种重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的构建方法,其特征在于,合成CCHFV毒株的结构蛋白Gc的基因,Gc的基因核苷酸序列参见SEQ ID NO.1,采用同源重组方法将上述基因插入pVAX-LAMP质粒载体,构建成pVAX-LAMP-CCHFV-Gc重组真核表达载体。
2.根据权利要求1所述的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的构建方法,其特征在于,所述CCHFV毒株为IbAr10200。
3.根据权利要求2所述的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的构建方法,其特征在于,插入pVAX-LAMP的酶切为点为EcoR I、Xho I。
4.根据权利要求3所述的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的构建方法,其特征在于,鉴定pVAX-LAMP-CCHFV-Gc重组真核表达载体所用的PCR方法的引物序列如下:
Primer-F:
5’-CTGCTGGACGAGAACAGCTTCCTGGACAGCACCGCCA-3’;
Primer-R:
5’-CAGCGATGGGGATCAGCATCCCGATGTGGGTCTTTGTGG-3’。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法构建的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc。
6.根据权利要求5所述的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的应用,其特征在于,所述pVAX-LAMP-CCHFV-Gc用于制备CCHFV疫苗。
7.根据权利要求5所述的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的应用,其特征在于,所述pVAX-LAMP-CCHFV-Gc免疫机体后可以抑制CCHFV tecVLP的感染。
8.根据权利要求5所述的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的应用,其特征在于,所述pVAX-LAMP-CCHFV-Gc免疫机体后可以有效促进免疫因子IL-10的表达。
9.根据权利要求5所述的重组真核表达载体pVAX-LAMP-CCHFV-Gc的应用,其特征在于,所述pVAX-LAMP-CCHFV-Gc免疫机体后可以有效刺激机体产生以中和抗体为代表的体液免疫应答。
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