[发明专利]检测免疫球蛋白G亚类的试剂盒及其制备方法和使用方法

权利要求书

1.一种检测免疫球蛋白G亚类的试剂盒，其特征在于，包括至少四种特异性抗体和检测抗体，所述至少四种特异性抗体包括抗人IgG1抗体、抗人IgG2抗体、抗人IgG3抗体和抗人IgG4抗体，所述检测抗体包括抗人IgG抗体。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述至少四种特异性抗体固定于固相载体。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体包括酶标板微孔、磁珠、亲和膜和液相芯片中的任意一种，所述液相芯片包括微球。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体为所述微球，所述抗人IgG1抗体、所述抗人IgG2抗体、所述抗人IgG3抗体和所述抗人IgG4抗体分别固定于所述微球以得到4种不同特异性抗体微球，将所述4种不同特异性抗体微球与反应缓冲液混合后得到特异性抗体溶液，每毫升所述特异性抗体溶液中含有5.0×10⁵～8.0×10⁵个所述微球。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述抗人IgG抗体与藻红蛋白偶联以得到藻红蛋白偶联抗体，将所述藻红蛋白偶联抗体与反应缓冲液混合后得到检测抗体溶液。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述抗人IgG抗体与所述藻红蛋白的质量比为1:(1～5)。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述检测抗体溶液的浓度为(2～6)μg/ml。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，采用的信号检测方法为可见光显色法、化学发光法和荧光发光法中的任意一种。

9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括洗涤缓冲液、反应缓冲液、样本稀释液、校准品和质控品。

10.一种如权利要求1～9任一项所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S0：提供抗人IgG1抗体、抗人IgG2抗体、抗人IgG3抗体、抗人IgG4抗体、抗人IgG抗体、微球和藻红蛋白，所述微球为负载有不同浓度的别藻蓝蛋白的聚苯乙烯荧光微球；

S1：将所述抗人IgG1抗体、所述抗人IgG2抗体、所述抗人IgG3抗体和所述抗人IgG4抗体分别固定于所述微球以得到4种不同特异性抗体微球，将所述4种不同特异性抗体微球与反应缓冲液混合后得到特异性抗体溶液；

S2：将所述抗人IgG抗体与所述藻红蛋白偶联以得到藻红蛋白偶联抗体，将所述藻红蛋白偶联抗体与反应缓冲液混合后得到检测抗体溶液。

11.一种如权利要求1～9任一项所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

S0：提供特异性抗体溶液、检测抗体溶液、稀释后待测样本和反应缓冲液，所述特异性抗体溶液包括至少四种特异性检测抗体，所述至少四种特异性检测抗体包括抗人IgG1抗体、抗人IgG2抗体、抗人IgG3抗体和抗人IgG4抗体，所述检测抗体溶液中的检测抗体包括抗人IgG抗体；

S1：依次加入所述反应缓冲液、所述稀释后待测样本和所述检测抗体溶液以得到混合溶液；

S2：向所述混合溶液中加入所述特异性抗体溶液，然后在室温下避光孵育，得到待检测溶液；

S3：检测所述待检测溶液中的不同微球的荧光强度以区分所述抗人IgG1抗体、所述抗人IgG2抗体、所述抗人IgG3抗体和所述抗人IgG4抗体，检测所述待检测溶液中的藻红蛋白的荧光强度以计算所述待测样本中的IgG1、IgG2、IgG3和IgG4的含量。