[发明专利]一种扶桑绵粉蚧表皮透射电镜样品制片方法

权利要求书

1.一种昆虫表皮透射电镜样品的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

取样：解剖活虫样品的虫体表皮并清除内容物，从而获得虫体表皮样品；

漂洗：对虫体表皮样品进行一次或多次漂洗；

脱水：对漂洗后的样品进行脱水处理，得到脱水后的虫体表皮样本；

渗透：用Spurr包埋剂与丙酮混合液处理所述的样本后，用包埋剂渗透处理样品；

干燥：将处理完毕后的样品加入纯Spurr包埋剂中整姿并加热干燥；

切片：对所述的样品进行切片；

染色：将所述切片后的样品经柠檬酸铅溶液染色，从而得到扶桑绵粉蚧表皮透射电镜样品。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的染色步骤中，所述的柠檬酸铅溶液的浓度为0.05-0.2M。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的漂洗步骤包括：将虫体表皮样品固定于戊二醛固定液中，然后用PBS缓冲液漂洗；然后将样品浸入锇酸，在用缓冲液漂洗。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的脱水处理包括：在梯度浓度的乙醇溶液中对样品进行脱水处理，再用乙醇和丙酮分别处理，得到脱水后的虫体表皮样本。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的乙醇浓度梯度依次包括：

25-35％(v/v)乙醇水溶液处理10-20min；

45-55％(v/v)乙醇水溶液处理10-20min；

65-75％(v/v)乙醇水溶液处理10-20min；

75-85％(v/v)乙醇水溶液处理10-20min；

85-95％(v/v)乙醇水溶液处理10-20min；

90-100％(v/v)乙醇水溶液处理10-20min。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的渗透处理包括：用Spurr包埋剂与丙酮的0.8-1.2:0.8-1.2(v/v)混合液和2-4:0.8-1.2(v/v)混合液分别处理S4的样品后，用Spurr包埋剂渗透处理样品。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的干燥处理包括：将样品加入纯Spurr包埋剂中整姿，然后在60-80℃加热至干燥。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的切片包括：在切片机上获得厚度为60-80nm的切片，并收集于带碳膜铜载网格上。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的染色方法为：将切片完全浸于柠檬酸铅溶液中染色5-20min，然后用双蒸水清洗切片并晾干。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的昆虫为扶桑绵粉蚧。