[发明专利]眼内液Q热立克次体的检测方法、探针组合物和试剂盒

权利要求书

1.用于检测眼内液Q立克次体的探针组合物，其特征在于，包含Cb-IS1111A探针组和/或Cb-com1探针组；

所述Cb-IS1111A探针组由序列如Seq_1所示引物Cb-IS1111A-F1，序列如Seq_2所示引物Cb-IS1111A-R2，和序列如Seq_3所示探针Cb-IS1111A-P1组成；

所述Cb-com1探针组由序列如Seq_4所示引物Cb-com1-F2，序列如Seq_5所示引物Cb-com1-R2，和序列如Seq_6所示探针Cb-com1-P1组成；

探针Cb-IS1111A-P1和探针Cb-com1-P1分别独立的修饰有荧光基团和猝灭基团。

2.根据权利要求1所述的探针组合物，其特征在于，所述探针组合物还包括内参基因探针组；

优选地，所述内参基因探针组由序列如Seq_7所示引物RP-F10，序列如Seq_8所示引物RP-R10，序列如Seq_9所示探针RP-P10组成；

探针RP-P10修饰有荧光基团和猝灭基团。

3.根据权利要求1或2所述的探针组合物，其特征在于，所述荧光基团选自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red或Cy5；

优选地，所述猝灭基团选自BHQ1、BHQ2、BHQ3或MGB。

4.根据权利要求3所述的探针组合物，其特征在于，所述探针组合物包含Cb-IS1111A探针组、Cb-com1探针组和内参基因探针组；且，探针Cb-IS1111A-P1、探针Cb-com1-P1和探针RP-P10修饰有互不相同的荧光基团；

优选地，探针Cb-IS1111A-P1的5’端修饰FAM荧光基团，3’端修饰BHQ1猝灭基团；探针Cb-com1-P1的5’端修饰VIC荧光基团，3’端修饰BHQ1猝灭基团；探针RP-P10的5’端修饰CY5荧光基团，3’端修饰BHQ3猝灭基团。

5.权利要求1-4任一项所述的探针组合物在如下(a)～(d)中的应用：

(a)用于非诊断和治疗目的的检测Q立克次体；

(b)用于制备检测Q立克次体的产品；

(c)用于制备检测眼内液病原体的产品；

(d)用于制备诊断眼部疾病的产品。

6.用于检测眼内液Q立克次体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1-4任一项所述的探针组合物。

7.一种非诊断和治疗目的的眼内液Q立克次体的检测方法，其特征在于，包括使用权利要求1-4任一项所述的探针组合物，或权利要求6所述的试剂盒对待测样本进行荧光PCR检测，然后依据扩增曲线判断Q立克次体是否存在。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述荧光PCR检测的反应体系中，所述Cb-IS1111A探针组中各引物和探针的工作浓度分别独立的为0.1～1.0μM，优选为0.2μM；

和/或，所述Cb-com1探针组中各引物和探针的工作浓度分别独立的为0.1～1.0μM，优选为0.2μM；

和/或，所述内参基因探针组中各引物和探针的工作浓度分别独立的为0.1～1.0μM，优选为0.12μM；

优选地，所述荧光PCR包括采用多重荧光PCR，所述荧光PCR检测的反应体系中，含有Cb-IS1111A探针组、Cb-com1探针组和内参基因探针组；

优选地，多重荧光PCR的反应体系的体积为25μL。