[发明专利]眼内液Q热立克次体的检测方法、探针组合物和试剂盒

说明书

本发明提供了一种眼内液Q热立克次体的检测方法、探针组合物和试剂盒，涉及分子诊断的技术领域。该探针组合物包含Cb‑IS1111A探针组和/或Cb‑com1探针组，Cb‑IS1111A探针组由引物Cb‑IS1111A‑F1，引物Cb‑IS1111A‑R2和探针Cb‑IS1111A‑P1组成；Cb‑com1探针组由引物Cb‑com1‑F2，引物Cb‑com1‑R2和探针Cb‑com1‑P1组成。该探针组合物具有扩增靶基因特异性好和灵敏度高的优点，改善了Q热立克次体的传统检测方式存在的检测速度慢、诊断操作繁琐复杂且存在病原体感染危险的问题。

技术领域

本发明涉及分子诊断技术领域，尤其是涉及一种眼内液Q热立克次体的检测方法、探针组合物和试剂盒。

背景技术

Q热立克次体，是Q热的病原体。形态为短杆状或球状，无鞭毛，无荚膜。不能在人工培养基上生长，可在鸡胚和鼠胚细胞，豚鼠和乳兔肾细胞、人胚纤维母细胞等多种人和动物培养基内繁殖。革兰氏染色阴性，有时亦可成阳性，专性细胞内寄生。

多种蜱可携带Q热立克次体，由吸血过程传递给动物，蜱的粪便也可散播病原体。现已确定，Q热在同种或不同种动物之间，可以直接接触传染，不需要昆虫媒介参与。由于蜱的吸血，把Q热立克次体带入人体内而引起的传染，是最普通的传染途径，但是，由患病动物娩出的胎儿及其分泌物、奶、粪便等污染外界环境而引起传播也是常见的。带蜱的狗也可将病原体传播给动物和人。

Q热临床表现无特异性，多数无任何症状，误诊和漏诊情况相当严重，一般表现为发烧或类似感冒的症状，可伴有肉芽肿性肝炎、肺炎，或脑膜炎。高热爆发病例，心肌炎和心包炎也有报道。临床表现的多样性取决于宿主因素。Q热在慢性期，心内膜炎是其主要的症状。在急性期应用抗生素有效，慢性期时治疗周期长，易复发，病死率较高。目前实验室诊断方法包括病原学、血清学和分子生物学。病原学诊断操作复杂，其分离率较低，灵敏度低，且存在病原体感染的安全问题；血清学诊断在发病一周内往往检测不到抗体，不能用于早期诊断。

综上所述，Q热立克次体的传统检测方式存在检测速度慢、诊断操作繁琐复杂且存在病原体感染危险的劣势，在临床上急需开发一种用于检测眼内液中Q热立克次体的产品以提供辅助诊断。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种用于检测眼内液Q立克次体的探针组合物，该探针组合物具有扩增靶基因特异性好和灵敏度高的优点，改善了Q热立克次体的传统检测方式存在的检测速度慢、诊断操作繁琐复杂且存在病原体感染危险的问题。

本发明的第二目的在于提供一种上述探针组合物的应用。

本发明的第三目的在于提供一种用于检测眼内液Q立克次体的试剂盒和检测方法。

为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种用于检测眼内液Q立克次体的探针组合物，该探针组合物包含Cb-IS1111A探针组和/或Cb-com1探针组；

所述Cb-IS1111A探针组由序列如Seq_1所示引物Cb-IS1111A-F1，序列如Seq_2所示引物Cb-IS1111A-R2，和序列如Seq_3所示探针Cb-IS1111A-P1组成；

所述Cb-com1探针组由序列如Seq_4所示引物Cb-com1-F2，序列如Seq_5所示引物Cb-com1-R2，和序列如Seq_6所示探针Cb-com1-P1组成；

探针Cb-IS1111A-P1和探针Cb-com1-P1分别独立的修饰有荧光基团和猝灭基团。

优选地，所述探针组合物还包括内参基因探针组；