[发明专利]一种利用CD155评价间充质干细胞生物学效力的方法有效
申请号: | 202211113993.4 | 申请日: | 2022-09-14 |
公开(公告)号: | CN115184246B | 公开(公告)日: | 2023-07-04 |
发明(设计)人: | 杜文静;韩之波;李文学;喻昊;严淑琳;赵梦;贾红红;毛爱斌 | 申请(专利权)人: | 天津昂赛细胞基因工程有限公司 |
主分类号: | G01N15/14 | 分类号: | G01N15/14;G01N33/569 |
代理公司: | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 | 代理人: | 何静 |
地址: | 300457 天津市滨海新区经济技*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 cd155 评价 间充质 干细胞 生物学 效力 方法 | ||
1.一种利用CD155评价间充质干细胞生物学效力的方法,其特征在于,使用荧光标记的抗体标记间充质干细胞表面的膜蛋白CD155,并采用流式细胞仪检测细胞CD155的阳性率和平均荧光强度MFI,通过检测间充质干细胞表面CD155的表达水平来评价该间充质干细胞的生物学效力,所述生物学效力是指间充质干细胞的免疫抑制活性,通过间充质干细胞与活化的外周血单个核细胞共培养,对外周血单个核细胞分泌TNF-α和IFN-γ的抑制能力。
2.据权利要求1所述的一种利用CD155评价间充质干细胞生物学效力的方法,其特征在于,所述间充质干细胞为脐带、骨髓、胎盘或脂肪来源的间充质干细胞。
3.根据权利要求2所述的一种利用CD155评价间充质干细胞生物学效力的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
S1:收集待测细胞:消化收集培养的间充质干细胞,细胞计数后转至流式管中;
S2:标记流式抗体:将细胞悬液离心,去掉上清液,向细胞沉淀中分别加入荧光标记的抗体,涡旋混匀后放置于室温避光孵育或4℃冰箱内孵育,加入流式细胞洗液洗掉未结合的抗体,离心后加入流式细胞洗液重悬细胞,利用过滤膜过滤掉细胞团块后等待检测;
S3:流式细胞仪检测:利用流式细胞仪检测间充质干细胞表面CD155的阳性率和MFI;
S4:当间充质干细胞表面CD155的阳性率90%且CD155 MFI228时,判定该细胞具有免疫抑制的生物学效力。
4.权利要求1-3任一所述的一种利用CD155评价间充质干细胞生物学效力的方法,其特征在于,用于细胞库及细胞注射液质量检测标准的制定。
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