[发明专利]一种高纯千金藤素的分离方法

说明书

本发明属于分离纯化技术领域，提供了一种高纯千金藤素的分离方法，包括以下步骤：A、将山乌龟片、地不容或含有千金藤素的防己科中药材为原料用研钵捣碎至粉末，加入提取剂超声提取20min后减压旋蒸浓缩除去提取剂；B、将步骤A中得到的提取液过硅胶柱进行层析，经洗脱后得到千金藤素粗品；C、将千金藤素粗品，通过0.45μm的膜后，经制备液相色谱进行纯化；D、将步骤C中得到的馏分经35℃下减压旋蒸除去甲醇，冷冻干燥，得白色固体，即纯化千金藤素。本发明的方法千金藤素纯度高，分离工艺简单可控，非常易于工业化生产的自动化。

技术领域

本发明属于分离纯化技术领域，具体是一种高纯千金藤素的分离方法。

背景技术

千金藤素(Cepharanthine)，白细胞增生药，能促进骨髓组织增生，从而升高白细胞。用于白细胞减少症。可使外周血白细胞增多，动物实验发现，可明显预防丝裂霉素引起的白细胞减少，但不抑制丝裂霉素的抗癌作用。其作用机制是促进骨髓组织增生，从而产生升高白细胞作用。用于因肿瘤化疗、放疗引起的粒细胞缺乏症和其他原因引起的白细胞减少症。现有技术中，千金藤素主的分离纯化方法工艺复杂，不易于工业化生产的自动化。

发明内容

本发明针对以上问题，提供了一种高纯千金藤素的分离方法，其特征在于，以山乌龟片、地不容或含有千金藤素的防己科中药材为原料，用提取剂提取，提取液过硅胶柱层析、洗脱，制备液相色谱分离，得到纯化千金藤素；

所述层析材料装填在吸附柱中，层析材料为有机烃类键合硅胶或含有极性有机官能团的有机烃类键合硅胶；吸附柱材料为两种以上键合硅胶的物理混合或两种以上有机烃类键合硅胶；

所述极性有机官能团选自酯基、氨基、酰胺基、脲基。

优选的，包括以下步骤：

A、将中药材山乌龟片用研钵捣碎至粉末，加入提取剂超声提取后减压旋蒸浓缩除去提取剂；

B、将步骤A中得到的提取液过硅胶柱进行层析，经洗脱后得到千金藤素粗品；

C、将千金藤素粗品过滤后，经制备液相色谱进行纯化；

D、将步骤C中得到的馏分经减压旋蒸除去甲醇，冷冻干燥，得白色固体，即纯化千金藤素。

优选的，提取剂为甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇的一种或一种以上的混合液。

优选的，所述层析材料的粒径为5-100um，孔径为

优选的，所述步骤B中，洗脱流速为5-30倍柱体积/小时。

优选的，所述步骤B中，洗脱液选自有机溶剂甲醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃、乙醇、异丙醇、二氧六环的任意一种，或一种以上有机溶剂的混合液与水混合，或一种以上有机溶剂的混合液与添加改性剂的水溶液混合。

优选的，所述洗脱液中水或水溶液粘的比例为10％-60％。

优选的，所述改性剂为甲酸、乙酸、三氟乙酸、三氯乙酸、磷酸、碳酸氢铵、氨水、三乙胺、二乙胺、乙酸铵或甲酸铵中的一种或一种以上的混合。

本发明的有益效果在于：

本发明公开了一种高纯千金藤素的分离方法，包括千金藤素的提取，色谱分离，收集和色谱纯度检测。取山乌龟、地不容或含有千金藤素的防己科中药材，捣碎，经甲醇提取后，过键合硅胶层析柱，所得馏分浓缩后，结晶，可得纯度达到98％的千金藤素纯品。采用本发明所述的方法，千金藤素纯度高，分离工艺简单可控，非常易于工业化生产的自动化。

附图说明

图1为典型千金藤素提取液层析分离在线检测图；

图2为千金藤素提取液质联用检测图；

图3为纯化千金藤素液质联用检测图。