[发明专利]一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法

权利要求书

1.一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取秦皮配方颗粒适量，研细，加入甲醇，超声处理后放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(2)对照品溶液的制备：分别精确称取秦皮甲素对照品、紫丁香苷对照品、秦皮苷对照品、秦皮乙素对照品、秦皮素对照品和木通苯乙醇苷B对照品适量，加入甲醇溶解并定容，配成混合对照品溶液；

(3)相对校正因子的计算：将步骤(2)中混合对照品溶液注入高效液相色谱仪，得到混合对照品溶液中秦皮甲素和其他各待测成分的峰面积，以秦皮甲素为内参物，分别计算紫丁香苷、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素和木通苯乙醇苷B的相对校正因子；

(4)目标化合物的含量计算：将步骤(1)中供试品溶液注入高效液相色谱仪，得到供试品溶液中各待测成分的峰面积，并结合步骤(3)中相对校正因子分别计算秦皮甲素、紫丁香苷、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素和木通苯乙醇苷B的含量；

(5)分析经步骤(3)和(4)计算得到的相对校正因子和目标化合物的含量。

2.根据权利要求1所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，步骤(3)和(4)中高效液相色谱条件为：

色谱柱：Waters Atlantis T3或Inertsil ODS-3；检测波长：220nm；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按以下梯度洗脱程序进行洗脱：

3.根据权利要求2所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，流速为0.9-1.1ml/min；

柱温为29-31℃；

理论板数按秦皮甲素峰计算应不低于2000。

4.根据权利要求2所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm；

仪器为Agilent 1260高效液相色谱仪或Waters e2695高效液相色谱仪。

5.根据权利要求1所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，秦皮甲素、紫丁香苷、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素和木通苯乙醇苷B的相对保留时间及相对校正因子如下：

6.根据权利要求1所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，步骤(2)中对照品溶液的制备为：精密称定秦皮甲素、紫丁香苷对照品、秦皮苷对照品、秦皮乙素对照品、秦皮素对照品、木通苯乙醇苷B对照品适量，加甲醇制成浓度为1523.43μg/ml，131.23μg/ml，632.32μg/ml，298.30μg/ml，202.30μg/ml，332.37μg/ml的混合对照品溶液，采用倍数稀释法，分别稀释2、4、8、16倍。

7.根据权利要求1所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，步骤(1)中供试品溶液的制备为：取秦皮配方颗粒0.3-0.7g，研细，置具塞锥形瓶中，加入50％甲醇50ml，超声处理30-60分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

8.根据权利要求7所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，所述超声处理的时间为30分钟，超声处理的功率250W，频率40kHz。

9.根据权利要求1所述的一测多评法测定秦皮配方颗粒中6种成分含量的方法，其特征在于，所述步骤(5)具体包括：结合供试品溶液的高效液相色谱图和紫丁香苷、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素和木通苯乙醇苷B的相对校正因子，通过相关系数法和t检验法分别比较一测多评法的计算值和外标法的实测值。