[发明专利]用于非小细胞肺癌CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器及检测方法

权利要求书

1.一种用于非小细胞肺癌CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器，其特征在于，

所述构建用于非小细胞肺癌CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器的方法为：将MB/PEI溶液滴加到清洁的玻碳电极表面上，室温干燥后再将KB/PEI-AuNPs分散液滴加到电极表面，室温干燥，将Ab₁滴加在电极上，4-5℃冰箱过夜孵育12-13h；用DEPC水冲洗干净后滴加1％牛血清蛋白(BSA)溶液4-5℃孵育40-45min；最后将获得的电极用DEPC水冲洗干净后，滴加PCN222(Fe)/AuNPs/Ab₂信号探针溶液于室温孵育1-2h，即得到用于CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器；

所述PCN222(Fe)/AuNPs/Ab₂信号探针溶液的制备方法为：向PCN222(Fe)/AuNPs分散液中加入的CYFRA21-1的多克隆抗体Ab₂，冰浴搅拌12-13h形成复合物，离心和洗涤后将复合物重新溶解在PBS溶液中，形成PCN222(Fe)/AuNPs/Ab₂信号探针溶液；

所述PCN222(Fe)/AuNPs分散液的制备方法为：PCN222(Fe)溶解于超纯水中，超声至分散均匀，加入AuNPs，置于搅拌器上常温搅拌4-5h，离心、洗涤，再将沉淀物分散在超纯水中，得到PCN222(Fe)/AuNPs分散液；

所述PCN222(Fe)的制备方法为：DMF中加入氯化锆、冰醋酸和H₂O，再加入Fe-TCPP，室温下保持磁力搅拌10-12分钟，将得到的溶液转移到反应釜中，然后在120-130℃下反应18-20小时；然后在10000-12000转/分的条件下离心10-12分钟，然后用乙醇洗涤，60℃烘箱中干燥，得到棕色的粉末为PCN222(Fe)；

所述KB/PEI-AuNPs的基底材料分散液的制备方法为：将AuNPs溶液加入到KB/PEI分散液中，然后在室温下搅拌4-5h，离心、洗涤，再将沉淀物分散在超纯水中，得到KB/PEI-AuNPs的基底材料分散液；

所述KB/PEI溶液的制备方法为:将KB加入超纯水中，超声溶解后加入1％的PEI溶液，磁力搅拌4-5h后，用超纯水离心、洗涤两次后，得到分散均匀的KB/PEI溶液。

2.如权利要求1所述的电化学免疫传感器，其特征在于，所述AuNPs的制备方法为：将1％HAuCl₄溶液加入至超纯水中煮沸，然后加入1％柠檬酸三钠溶液继续煮沸15分钟，冷却后用超纯水恢复至原体积得透明的酒红色溶液即为纳米金(AuNPs)。

3.如权利要求1所述的电化学免疫传感器，其特征在于，所述MB/PEI溶液的制备方法为:将MB加入超纯水中，超声至分散均匀后加入1％的PEI溶液，磁力搅拌2h后得到分散均匀的MB/PEI溶液。