[发明专利]一种鉴别结直肠癌中医证型的构建方法

说明书

本发明提供了一种鉴别结直肠癌中医证型的方法，涉及代谢组学技术领域。本发明提供结直肠癌湿热蕴结证、瘀毒内阻证、脾虚气滞证、肝肾阴虚证、气血两虚证血清样本；测定上述血清样本的代谢组学图谱，构建正交偏最小二乘判别分析(OPLS DA)模型。本发明利用液相色谱质谱联用(LC‑MS)技术结合常规的数据处理软件和数据建模软件即可进行模型的构建，构建方法简单，一次分析即可快速、准确地鉴别结直肠癌不同中医证型，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及代谢组学技术领域，特别涉及一种鉴别结直肠癌中医证型的构建方法。

背景技术

结直肠癌(colorectalcancer,CRC)是全球最常见的恶性肿瘤之一。目前结直肠癌的治疗手段主要包括外科手术、放化疗、靶向治疗、免疫治疗等，治疗手段的进步极大改善了患者的预后和生存质量。然而，晚期CRC的五年生存率仍低于20％，因此从新的角度寻找提高结直肠癌疗效的方法十分有必要。中医药在治疗CRC时具有加快术后康复、减轻治疗并发症、提高放化疗敏感性、降低放化疗副反应等作用，在临床实践中作为辅助疗法和综合治疗的一部分得到了广泛应用。中医是我国特有的医学理论体系，临床实践证明了其疗效确切，辨证论治是中医学中最具特色的部分，是治疗疾病的基础与核心。传统的辨证主要是依靠主诊中医医师的主观判断，缺乏客观指标的支持。因此，迅速鉴定出客观化的中医证候对CRC患者进一步治疗具有重要意义。目前尚未有快速鉴定客观化中医证型的方法的报道。

代谢组学研究的对象是内源性代谢产物，能够从小分子代谢物层面反映生物体的整体信息，其整体分析特点与中医学“整体观”、“辨证论治”不谋而合。LC-MS流动相为液体，具有分离能力强、分析范围广、分析时间快、自动化程度高等优点，是目前代谢组学研究中的最常用的分析技术也是最有发展前途的技术。应用代谢组学技术可寻找出不同证型结直肠癌的差异代谢物，是研究中医证型物质基础的重要手段之一。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种鉴别结直肠癌中医证型的构建方法。采用本发明构建的模型能够实现结直肠癌中医证型的快速鉴别。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

提供结直肠癌湿热蕴结证、瘀毒内阻证、脾虚气滞证、肝肾阴虚证、气血两虚证血清样本；将待检血清样本采用LC-MS血清代谢组学技术进行分析，得到待检血清样本的原始代谢指纹图谱；将原始代谢指纹图谱进行图谱预处理，得到可以用于统计分析的代谢物信息；将每组差异代谢物信息导入血清代谢组学分析模型中，找出该代谢物信息在血清代谢组学分析模型中的位置，用于分析待检血清样本的代谢组学情况。

上述方法中，血清代谢组学分析模型的构建方法，包括以下步骤：

(1)收集结直肠癌湿热蕴结证、瘀毒内阻证、脾虚气滞证、肝肾阴虚证、气血两虚证血清样本，作为分析样本；

(2)将每个分析样本采用LC-MS血清代谢组学技术进行分析，得到原始代谢指纹图谱；

(3)将原始代谢指纹图谱进行图谱预处理，进行主成分分析和偏最小二乘判别分析，得OPLS-DA模型，对得到的OPLS-DA模型进行验证，无过拟合危险，则所得OPLS-DA模型即为鉴别结直肠癌中医证型的血清代谢组学分析模型。

上述方法中，所述待检血清样本，既可以是一个人的单一血清样本，也可以是多个人的独立存在的多个血清样本。

上述方法中，待检血清样本和模型构建时采用相同的LC-MS血清代谢组学技术和图谱预处理方法。