[发明专利]芪丹通脉片全链条质量检测控制方法

权利要求书

1.芪丹通脉片全链条质量检测控制方法，包括实现了对芪丹通脉片全方丹参、当归、桂枝、红花及黄芪5味药的质量检测与控制，其特征在于，通过指纹图谱技术手段实现对药味质量、制剂工艺控制与产品质量的控制，包括以下步骤：

S1、色谱条件：以八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.2％甲酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱：0～50min，A:5％～37％,B:95％～63％；50～52min，A:37～52％,B:63％～48％；52～80min，A:52％～76％,B:48％～24％；

S2、分段波长检测：+0～10min，波长为280nm；10～20min，波长为403nm；20～27min，波长为：260nm；27.00～32min，波长为403nm；32～80min，波长为：280nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3800；

S3、对照品溶液制备：取丹酚酸B对照品适量，精密称定后加甲醇制成每1ml含丹酚酸B40μg的溶液，得到对照品溶液；

S4、供试品溶液制备：取芪丹通脉片20片，除去糖衣，精密称定，研细，取0.5-lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，采用无灰定量过滤，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；

S5、测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，得到检测数值；

S6、精密度检测：取同一供试品溶液，同一进样量，连续进样6次，按实验条件依法测定，并按指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算测定结果；

S7、稳定性检测：取同一供试品溶液，在38小时内不同时间进样5次，按实验条件依法测定，并按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算；

S8、重现性实验，取同一批号的供试品6份，按上述S1-S5方法进行制备并进行检测，并按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算；

S9、对照建立指纹图谱：选取不同批号的10批次样品，按照上述供试品制备和色谱条件进行测定，采用指纹图谱相似度软件2.0进行评价，以不同批号出峰及保留时间相对稳定的16个指纹峰建立指纹图谱，其中指定10号峰丹酚酸B为S峰，建立对照图谱，通过对照图谱进行对比；

S10、指纹峰药味归属确认：分别按比例称取各药味饮片，按供试品溶液制备方法制备单味药溶液，通过与对照指纹图谱进行比对；

S11、指纹峰指认：采用各味药材所含特成分对照品对指纹图谱各指纹峰进行指认；

S12、物质链传递，各药味与中间体及制剂比较：将所有药味的单味药色谱图与中间体及制剂色谱图相比，显示出峰数量与峰面积值；

S13、中间体与制剂比较：通过对制剂各指纹峰数量及面积进行分析，确保红花的4指纹个峰约占到总峰面积的44.4％；丹参的7个指纹峰占到总峰面积的42.5％；桂枝的1个指纹峰占比为3.3％；黄芪1个指纹峰占比为1.2％；当归的1个指纹峰约占到总峰面积0.6％；1、2、11号峰为经提取后中间体和制剂新产生的指纹峰，峰面积占比为8.0％。

2.根据权利要求1所述的芪丹通脉片全链条质量检测控制方法，其特征在于：所述S5中相色谱仪采用Agilent1260高效液相色谱仪。

3.根据权利要求1所述的芪丹通脉片全链条质量检测控制方法，其特征在于：所述S1中，乙腈为色谱纯；其它试剂均为分析纯。

4.根据权利要求1所述的芪丹通脉片全链条质量检测控制方法，其特征在于：检验波长过程中采用200-400nm的PDA检测器进行扫描检测。

5.根据权利要求1所述的芪丹通脉片全链条质量检测控制方法，其特征在于：所述S5中色谱仪中色谱柱选择KrosimasilC18柱(5μm，4.6X250mm)色谱柱；岛津Inert Sustain C18(5um,4.6×250mm)色谱柱；资生堂CAPCELL PAK MG C18(5μm，4.6X250mm)色谱柱中的一种或多种。