[发明专利]一种厚朴温中汤汤剂及基准样品特征图谱的建立及含量测定方法

权利要求书

1.一种厚朴温中汤汤剂及基准样品特征图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)供试品的制备：取固相萃取小柱，活化后，取厚朴温中汤汤剂及基准样品上样后用甲醇溶液淋洗和洗脱，收集洗脱液，得厚朴温中汤供试品溶液；

(b)对照品的制备：精密称取厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷、甘草苷、甘草酸铵、山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮、去氢木香内酯、木香烃内酯、6-姜辣素，分别加甲醇制成对照品溶液；

(c)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，其中梯度洗脱程序为：0～65min，流动相A为11％～57％，流动相B为89％～43％；65～72min，流动相A为57％～66％，流动相B为43％～34％；72～75min，流动相A为62％～85％，流动相B为38％～15％；75～82min，流动相A为85％～90％，流动相B为15％～10％，流速0.8～1.2mL·min^-1，检测波长210～290nm，柱温20～40℃；

(d)分别取混合对照品和供试品溶液5～20μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。

2.根据权利要求书1所述的特征图谱的建立方法，其特征在于，取厚朴温中汤汤剂及基准样品提取液，趁热过滤，得到的滤液趁热离心10min，取上清液备用；取C18-U固相萃取小柱，用甲醇5mL活化，水5mL平衡，平衡后，精密量取离心上清液5mL上样，加10％甲醇5mL淋洗，再加纯甲醇5mL洗脱，收集洗脱液，得厚朴温中汤供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的特征图谱的建立方法，其特征在于，混合对照品的制备方法如下：精密称取毛厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷、甘草苷、甘草酸铵、山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮、去氢木香内酯、木香烃内酯、6-姜辣素适量，分别加甲醇制成8～55mg·L^-1的混合对照品溶液。

4.根据权利要求1所述的特征图谱的建立方法，其特征在于，厚朴温中汤汤剂及基准样品特征图谱测定的色谱条件为：采用Diamonsil C18色谱柱，4.6mm×150mm，5μm。

5.根据权利要求1所述的特征图谱的建立方法，其特征在于，测定方法具体操作过程为：分别精密吸取对照品和供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图的时间为82min。

6.根据权利要求1所述的特征图谱的建立方法，其特征在于，通过混标和厚朴温中汤全方的图谱，共指认12个色谱峰，其中第8、11号峰分别为和厚朴酚与厚朴酚；第2号峰为橙皮苷；第1、4号峰分别为甘草苷和甘草酸；第3、6、7、12号峰分别为山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮；第9、10号峰分别为木香烃内酯与去氢木香内酯；第5号峰为6-姜辣素。