[发明专利]一种厚朴温中汤汤剂及基准样品特征图谱的建立及含量测定方法

说明书

本发明涉及中药分析领域，特别涉及一种厚朴温中汤汤剂及基准样品特征图谱及含量测定方法的建立。特征图谱建立方法步骤包括供试品溶液的制备、将供试品溶液注入高效液相色谱、记录色谱图、方法学考察。另建立了厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷和山姜素4个指标成分的含量测定方法，并进行了精密度、重复性、稳定性、专属性、线性关系、加样回收率和耐用性考察，得出该方法的方法学考察结果较好，耐受性较高，适用于厚朴温中汤指标成分的含量测定。通过建立指标成分含量测定方法和特征图谱含量测定方法为厚朴温中汤汤剂基准样品的质量控制提供依据。

技术领域

本发明涉及中药制剂的质量控制方法，特别是涉及一种用高效液相色谱法对厚朴温中汤汤剂及基准样品制剂特征图谱的构建方法及含量测定方法。

背景技术

基准样品是是经典名方开发过程中的关键物质，开展基准样品的质量研究，需要从多方面进行整体质量评价，如质量控制成分的含量、特征图谱、得膏率等。质量控制成分的选取在控制复方制剂的质量上极为重要。

厚朴温中汤中厚朴为“君药”，其药理作用与厚朴温中汤整方的药理作用类似，厚朴酚与和厚朴酚为《中国药典》(2020年版)中的质量控制成分，并且这两个成分的药理活性在本方治疗胃肠疾病中发挥着重要作用；草豆蔻为本方的“臣药”，其成分山姜素具有保护胃黏膜的药理作用；陈皮中的橙皮苷成分在复方中的含量较高，并且也具有抗胃溃疡的药理作用。

专利CN 113156010 A中提供了厚朴温中汤物质基准的橙皮苷、和厚朴酚、厚朴酚三种成分的定量分析测定方法；橙皮苷、山姜素、小豆蔻明、和厚朴酚、厚朴酚、桤木酮、甘草酸铵、木香烃内酯8种成分的定性分析方法；一种薄层色谱鉴别方法。

按前期考证结果及综合复方的“君臣佐使”和Q-maker预测分析，确定厚朴温中汤适宜的质量控制成分为厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷和山姜素。并确定和厚朴酚、厚朴酚、橙皮苷、甘草苷、甘草酸、山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮、木香烃内酯、去氢木香内酯、6-姜辣素的特征图谱建立方法。通过建立指标成分含量测定方法和特征图谱含量测定方法为基准样品的质量控制提供依据，通过考察煎煮、浓缩工艺确定基准样品的制备方法，为基准样品的制备提供参考。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种厚朴温中汤汤剂及基准样品特征图谱的建立方法及含量测定方法，用于评价和控制厚朴温中汤汤剂的质量，以确保厚朴温中汤汤剂的质量稳定性、一致性和可控性，为控制该制剂质量提供了新的技术方法，旨在解决目前对厚朴温中汤汤剂的质量控制技术不足的问题。

按前期考证结果，厚朴温中汤汤剂及基准样品制备工艺为：取姜厚朴和橘红各37.30g，炒甘草，草豆蔻，茯苓块和木香各18.65g，干姜片2.61g，混合后粉碎成粗粉，称取10.0g，加生姜3.0g，加水400mL，1200W煎煮15min后转200W煎煮至体积为200mL，趁热过滤，得到的滤液趁热离心(4000r.min^-1)10min，即得厚朴温中汤汤剂及基准样品。

本发明提供一种厚朴温中汤汤剂及基准样品特征图谱的建立方法及含量测定方法，其中特征图谱的具体步骤包括：

(a)供试品的制备：取固相萃取小柱，活化后，取厚朴温中汤汤剂及基准样品上样后用不同浓度的甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，得厚朴温中汤供试品溶液；

(b)对照品的制备：精密称取厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷、甘草苷、甘草酸铵、山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮、去氢木香内酯、木香烃内酯、6-姜辣素适量，分别加甲醇制成一定浓度的对照品溶液；