[发明专利]检测活性可溶性尿激酶受体的方法和检测用试剂盒

说明书

本发明涉及检测活性可溶性尿激酶受体的方法和检测用试剂盒，该活性可溶性尿激酶受体亦称为活性可溶性尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(suPAR)。该方法包括如下步骤：使捕获试剂与待测样品接触，形成捕获试剂与活性suPAR的复合物；使所形成的复合物与特异性结合被捕获的活性suPAR的试剂结合，并通过检测特异性结合被捕获的活性suPAR的试剂来检测被捕获的活性suPAR，所述捕获试剂是含有ATF的融合蛋白。本发明还涉及上述检测方法所用的试剂盒。本发明方法呈现如说明书所述优良技术效果。

技术领域

本发明属于生物医学检测领域，具体涉及对活性尿激酶受体进行检测的方法，特别是涉及对活性可溶性尿激酶受体进行检测的方法，该活性可溶性尿激酶受体亦称为活性可溶性尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(Active soluble urokinase-type plasminogenactivator receptor，Active soluble uPAR，活性suPAR)。本发明还涉及上述检测方法所用的试剂盒。

背景技术

CN105954522B(中国专利申请号201610541379.6)公开了一种活性尿激酶受体的检测方法，其全部内容通过引用并入本文。尿激酶受体(urokinase type plasminogenacitivator receptor，尿激酶型纤溶酶原激活剂受体，uPAR)是一种细胞表面受体。该受体由Stoppelli等于1985年发现，1989年Roldan等克隆了其cDNA，1990年Behrendt等用亲和层析法从人淋巴瘤细胞U937的细胞膜抽提液中纯化出该蛋白。在第五次国际白细胞分化抗原会议上，uPAR被命名为分化抗原簇87(cluster of differentiation 87，CD87)。uPAR是一种高度糖基化的表面膜蛋白，广泛表达于免疫细胞表面，例如激活的嗜中性粒细胞、单核细胞、激活的T淋巴细胞、巨噬细胞，以及多种恶性肿瘤细胞表面，但是在绝大多数正常细胞表面表达量较低[A.Estreicher,et al.The Journal of cell biology 111(2)(1990)783-92；C.Pyke,et al.Histopathology 24(2)(1994)131-8；M.Thuno,et al.Diseasemarkers27(3)(2009)157-72；F.Blasi,et al.Molecular cell biology 3(12)(2002)932-43；T.Plesner,et al.Stem cells 15(6)(1997)398-408]。

作为一种柔性分子，uPAR可与多种配体或受体相互作用。如玻连蛋白(vitronectin)、尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator，uPA)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low density lipoprotein receptor-relatedprotein 1，LRP1)、整联蛋白(integrin)、G蛋白偶联受体(G protein coupledreceptor，GPCR)等。这些不同的相互作用在人体多种生理及病理过程中发挥着广泛的重要作用，包括纤溶酶原的激活、细胞黏附和迁移、细胞分化、化学增活现象、趋化因子受体调节、免疫应答、炎症反应等。uPAR由三个富含半胱氨酸、大小为81-87个氨基酸的Ly6/uPAR结构域组成(D1，D2，D3)，分子量约为55kDa。uPAR通过其C端的糖基化磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol，GPI)锚定在细胞膜表面[F.Blasi,et al.Naturereviews.Molecular cell biology 3(12)(2002)932-43；H.W.Smith,et al.Naturereviews.Molecular cell biology 11(1)(2010)23-36]。