[发明专利]一种室温条件下具有扩增活性的DNA聚合酶及其应用

权利要求书

1.蛋白质IME199DNAP，为C1)-C4)中任一种：

C1)氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的蛋白质；

C2)在C1)所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；

C3)将C1)或C2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有DNA聚合酶活性、3’→5’核酸外切酶活性、链置换活性和/或引物酶活性的蛋白质；

C4)与将C1)或C2)所示的蛋白质的氨基酸序列具有80％或80％以上同源性且具有DNA聚合酶活性、3’→5’核酸外切酶活性、链置换活性和/或引物酶活性的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白质IME199DNAP的核酸分子。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为如下e1)或e2)或e3)所示的DNA分子：

e1)核苷酸序列是SEQ ID NO：1所示的DNA分子；

e2)与e1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码权利要求1所述蛋白质IME199DNAP的DNA分子；

e3)在严格条件下与e1)或e2)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述蛋白质IME199DNAP的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述核酸分子的表达盒、重组载体或重组微生物。

5.权利要求1所述蛋白质IME199DNAP、权利要求2或3所述核酸分子或含有权利要求2或3所述核酸分子的表达盒、重组载体或重组微生物在制备DNA聚合酶或作为DNA聚合酶中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述DNA聚合酶具有3’→5’核酸外切酶活性和/或链置换活性。

7.权利要求1所述蛋白质IME199DNAP、权利要求2或3所述核酸分子或含有权利要求2或3所述核酸分子的表达盒、重组载体或重组微生物在制备引物酶或作为引物酶中的应用。

8.权利要求1所述蛋白质IME199DNAP、权利要求2或3所述核酸分子或含有权利要求2或3所述核酸分子的表达盒、重组载体或重组微生物在扩增DNA中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述DNA为单链DNA或双链DNA。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述扩增DNA，可以使用引物，也可以不使用引物。