[发明专利]一种作为内切β-1,3-葡聚糖酶的蛋白质、其制备方法及其应用

权利要求书

1.一种作为内切β-1,3-葡聚糖酶的蛋白质，其特征在于：是由SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列编码组成的蛋白质。

2.一种编码重组内切β-1,3-葡聚糖酶的基因，其特征在于：其核苷酸序列为SEQ IDNO.1所示的DNA序列；利用密码子优化后获得编码权利要求1所述氨基酸序列的DNA分子。

3.一种重组内切β-1,3-葡聚糖酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)重组质粒

所述重组质粒是在载体中插入权利要求2所述编码重组内切β-1,3-葡聚糖酶的基因的DNA片段；

2)重组菌

将重组质粒转化表达至宿主大肠杆菌BL21(DE3)，得到重组菌；

3)制取粗酶液

将重组菌接种至LB液体培养基，在37℃，200rpm条件下培养至OD600在0.6-0.8之间，加入IPTG至终摩尔浓度为0.2-2mM，在15-30℃诱导6-20小时；然后离心收集菌体，破壁后得到粗酶液，从而得到内切β-1,3-葡聚糖酶。

4.一种权利要求1所述的重组内切β-1,3-葡聚糖酶的应用，其特征在于：利用所述内切β-1,3-葡聚糖酶水解聚糖，制备聚合度为3-5的可溶性β-1,3连接的葡寡糖；所述聚糖为可得然多糖和昆布多糖中至少一种。

5.根据权利要求4所述的重组内切β-1,3-葡聚糖酶的应用，其特征在于：可将昆布多糖、昆布五糖或昆布四糖水解成低聚糖。

6.一种权利要求1所述的重组内切β-1,3-葡聚糖酶的应用，其特征在于：所述的内切β-1,3-葡聚糖酶作为生防制剂，用于制备果蔬采后致病真菌防治的生物抗菌剂。

7.根据权利要求6所述的重组内切β-1,3-葡聚糖酶的应用，其特征在于：果蔬采后致病真菌为褐腐菌、互隔链格孢菌或胶孢炭疽菌。