[发明专利]一种检测人ApoE基因突变的引物探针组及试剂盒在审
| 申请号： | 202211167379.6 | 申请日： | 2022-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN116144749A | 公开（公告）日： | 2023-05-23 |
| 发明（设计）人： | 高强;牛成镇;吴超超;朱建国 | 申请（专利权）人： | 杭州佰辰医学检验所有限公司;杭州佰辰医疗器械有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人： | 金方玮 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市西湖*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 apoe 基因突变 引物 探针 试剂盒 | ||
1.一种检测人ApoE基因突变的引物探针组，其特征在于，包括检测ApoE T388C引物对与探针以及检测ApoE C526T引物对与探针；
所述检测ApoE T388C引物对与探针包括：388F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，388R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，探针388P的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；
所述检测ApoE C526T引物对与探针包括：526F的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，526R的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示，探针526P的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。
2.根据权利要求1所述的一种检测人ApoE基因突变的引物探针组，其特征在于，所述的检测探针5’端标记荧光基团修饰，3’端标记淬灭基团修饰。
3.根据权利要求2所述的一种检测人ApoE基因突变的引物探针组，其特征在于，所述荧光基团选自ROX、FAM、HEX、VIC、NED、TET、JOE、CY3、CY5、CY7或AMCA中的一种，淬灭基团选自TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3、DABCYL或QYS-7中的一种。
4.根据权利要求3所述的一种检测人ApoE基因突变的引物探针组，其特征在于，探针388P的荧光基团为FAM，猝灭基团为BHQ1；探针526P的荧光基团为ROX，猝灭基团为BHQ2。
5.一种检测人ApoE基因突变的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-4任一项所述的检测人ApoE基因突变的引物探针组。
6.根据权利要求5所述的一种检测人ApoE基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR反应液，在反应体系中，F端引物浓度为0.01-4μM，R端引物浓度为0.01-4μM，探针浓度为0.01-0.5μM，MgCl2浓度为1.5-2.25mM，等浓度的四种脱氧核糖核苷酸混合液终浓度为0.1-0.2mM，Taq酶的浓度为1-2U/反应。
7.根据权利要求6所述的一种检测人ApoE基因突变的试剂盒，其特征在于，还包括UNG酶，UNG酶的浓度为0.5-1U/反应。
8.根据权利要求7所述的一种检测人ApoE基因突变的试剂盒，其特征在于，在反应体系中，F端引物浓度为0.1-2μM，R端引物浓度为0.1-2μM，探针浓度为0.01-0.2μM。
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