[发明专利]一种含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物及合成方法

说明书

本发明公开了一种含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物及合成方法，属于化学合成技术领域。在运用光敏亲和标记技术时，炔基是常用的亲和基团，而二苯甲酮是常用的光敏基团。当运用该技术研究活性多肽的靶点时，常使用非天然氨基酸替换来引入光敏基团和亲和基团，但需替换原序列中的两个残基才能引入这两个功能基团。这可能导致多肽活性改变而影响实验结果。鉴于此，本发明以4‑溴苯丙醇为起始原料，通过与叔丁基二苯基氯硅烷反应等8步反应，高效合成了9‑笏甲氧羰基保护的、含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物。该衍生物可以直接用于合成多肽光敏亲和探针，单氨基酸替换就能实现光敏基团和亲和基团的引入，具有广阔的推广应用前景。

技术领域

本发明公开了一种含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物及合成方法，属于化学合成技术领域，用于合成多肽光敏亲和探针。

背景技术

光敏亲和标记技术利用光敏交联将配体分子与目标蛋白之间的非共价作用转化为共价结合，再利用亲和基团对目标蛋白进行分离以便下游分析，广泛应用于活性分子靶点鉴定、构效关系研究、配体-靶点结合位点分析、蛋白-蛋白相互作用研究等领域。

在运用光敏亲和标记技术时，需要在尽量保留原分子活性的基础上引入光敏基团和亲和基团，以实现光敏活化连接和目标蛋白分离纯化。炔基是常用的亲和基团，其可通过点击化学反应连接其他功能分子，而二苯甲酮则是常用的光敏基团。当合成光敏性多肽亲和探针时，常在合成多肽时使用非天然氨基酸替换来引入光敏基团和亲和基团，但需替换原序列中的两个残基才能引入这两个功能基团。这可能导致多肽活性的改变而影响实验结果。因此，需要设计合成一种新型的既含有光敏基团，又含有亲和基团的氨基酸衍生物。

发明内容

本发明的目的在于解决在合成多肽光敏亲和探针时不能通过单氨基酸替换同时引入光敏基团和亲和基团的问题，提供一种含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物及合成方法。

本发明解决上述问题采用的技术方案：一种含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物含炔基和二苯甲酮基团，氨基被笏甲氧羰基保护，直接用于多肽合成，结构如下：

本发明的一种含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物的合成方法，以4-溴苯丙醇为起始原料，通过与叔丁基二苯基氯硅烷8步反应，得到笏甲氧羰基保护的、含炔基和二苯甲酮基团的苯丙氨酸衍生物；

所述反应路线如下：

步骤一、根据合成路线，中间体2的合成方法为：用1eq二氯甲烷溶解化合物1和4-二甲氨基吡啶0.1eq，0℃下滴加1eq叔丁基二苯基氯硅烷，0℃下搅拌反应两小时；反应液用2-3倍体积5％柠檬酸的洗涤2次，再用2-3倍体积饱和碳酸氢钠溶液洗涤1次，然后用无水硫酸钠干燥、过滤，浓缩得化合物2；

步骤二、根据合成路线，中间体2-1的合成方法为：用1eq二氯甲烷溶解化合物2-1，加入数滴催化量的N，N-二甲基甲酰胺，紧接着0℃下再滴加1.3eq草酰氯，反应液升至室温后继续搅拌3小时，再浓缩得化合物2-2；

步骤三、根据合成路线，中间体2a的合成方法为：0℃下，在1.2eqN，O-二甲基羟胺盐酸盐、3eq吡啶的二氯甲烷溶液中滴加1eq化合物2-2的二氯甲烷溶液，搅拌反应4小时；反应液先真空浓缩除去二氯甲烷，然后用2-3倍体积乙酸乙酯稀释，接着用2-3倍体积1M稀盐酸和2-3倍体积饱和盐水各洗涤1次，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩得化合物2a；

步骤四、根据合成路线，中间体3的合成方法步骤如下：