[发明专利]一种抗天然辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素通用单克隆抗体HOPE1及其应用在审
申请号: | 202211196721.5 | 申请日: | 2022-09-28 |
公开(公告)号: | CN116063538A | 公开(公告)日: | 2023-05-05 |
发明(设计)人: | 徐振林;温伟桓;陈润禧;罗林;陈子键;沈玉栋;雷红涛;王芷若;王语璞;曾海力 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C07K16/44 | 分类号: | C07K16/44;C12N15/13;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/53;G01N21/31 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 段卉 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 天然 辣椒素 合成 通用 单克隆抗体 hope1 及其 应用 | ||
1.一种抗天然辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素通用单克隆抗体,其特征在于,重链可变区序列如SEQ ID NO.1所示,轻链可变区序列如SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述的单克隆抗体在天然辣椒素、二氢辣椒素、、合成辣椒素中的一种或多种的含量检测和/或制备天然辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素中的一种或多种的含量检测的试剂盒中的应用。
3.一种天然辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素中的一种或多种的含量检测的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述单克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包含ic-ELISA免疫检测法所需试剂。
5.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包含时间分辨荧光免疫层析法所需试剂。
6.一种检测天然辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素中的一种或多种的含量的ic-ELISA免疫检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将样品提取液加入包被有结构式如(I)所示的天然辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素通用人工完全抗原Hapten C-KLH的ELISA板中,同时加入权利要求1所述单克隆抗体,在35~40℃水浴10~20min,水浴后洗板;
S2.加入二抗,在35~40℃水浴10~20min,水浴后洗板;
S3.加入显色液,在35~40℃水浴10~20min,水浴后洗板;
S4.加入终止液,测定溶液在420~480nm处的吸光度值,将吸光度值代入标准曲线中计算样品中天然辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素中的一种或多种的含量;
7.一种检测天然辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素中的一种或多种的含量的时间分辨荧光免疫层析法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将偶联有权利要求1所述单克隆抗体的时间分辨荧光探针加入到样品待测液中,反应1~5min;
S2.往样品待测液中加入试纸条,跑样3~7min;
S3.检测试纸条T线、C线在320~400nm紫外光下的荧光强度,计算T线与C线荧光强度的比值,根据T线与C线荧光强度的比值计算样品中天然辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素中的一种或多种的含量;
其中,S3中T线上包被有权利要求1所述单克隆抗体,C线上包被有二抗。
8.一种编码权利要求1所述单克隆抗体的核苷酸序列。
9.一种含有权利要求8所述核苷酸序列的载体。
10.一种重组细胞,其特征在于,含有权利要求9所述载体或表达权利要求1所述单克隆抗体。
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