[发明专利]一种多花黄精新品种再生与体外成苗的方法

说明书

本发明公开一种多花黄精新品种再生与体外成苗的方法，涉及植物生物技术领域，针对多花黄精新品种——祁源黄精繁殖所存在的诸多问题，以其块茎萌发幼苗的幼嫩叶片为外植体来源，利用组织培养技术结合体外成苗技术，研发了一种高效的、短周期的祁源黄精离体繁育技术。本发明的有益效果在于：简化了黄精不定芽增殖、伸长和生根与驯化步骤，实现不定芽增殖与伸长同步化，生根与驯化同步化，培养11周后即可完整的祁源黄精离体再生植株。本发明为后期祁源黄精种苗的规模化繁殖、推广应用及品种改良提供了技术支撑。

技术领域

本发明涉及植物生物技术领域，具体涉及一种多花黄精新品种再生与体外成苗的方法。

背景技术

多花黄精(Polygonatum cyrtonema)为百合科黄精属多年生草本药用植物，其根茎含有丰富的糖类、甾体皂苷、强心苷、生物碱和黄酮等多种药用化合物，具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功效。近年来，随着人们生活水平的提高和市场对多花黄精的需求的增加，使得黄精的产业化栽培发展面临着前所未有的机遇。由于野生黄精资源被过度采挖，并逐渐枯竭，而市场上多花黄精的用量逐渐加大，迫使大面积人工栽培以补充资源的不足，这就造成近期市场上多花黄精种苗供应短缺的现象。同时，由于一个良种可以带动一个产业，多花黄精种苗质量的优劣、余缺，不仅直接影响黄精的品质和产量，也关系到中药产业的健康可持续发展和人们的生命安全。因此，在多花黄精种质资源选育的基础上，研究多花黄精优良品种的高效、短周期、低成本快繁技术对多花黄精产业的可持续发展具有重要意义。

祁源黄精作为选育的多花黄精新品种(审定编号：皖品鉴登字第1806007)与常规种植的多花黄精相比具有较大的营养器官和较高的有效成分含量，具有更高的药用价值和市场需求。目前，祁源黄精主要采用种子和根茎为原始材料进行繁殖，通过播种方式进行繁殖存在种子萌发周期长，萌发率低，繁殖受季节和时节限制且很难保持母本株系的遗传稳定性等问题；而利用块茎进行繁殖虽然能保持母本株系的优良农艺性状，但却存在繁殖材料有限和繁殖系数低的问题，很难满足祁源黄精的产业化种植和推广应用需求。植物组织培养技术作为现代生物技术具有繁殖效率高，繁殖周期短，繁殖不受季节和时间限制等优势，在植物种苗规模化繁育中起着重要作用。目前有关利用植物组织培养技术对多花黄精进行繁育的研究已有报道，如公开号为CN 109302983 A的专利公开一种以顶芽为外植体的多花黄精快速繁殖方法，但存在繁殖周期长，成本高，重复性差的问题，且并不适用于多花黄精新品种——祁源黄精的快速繁殖。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种适用于多花黄精新品种高效再生和体外成苗的方法，且成苗时间短，繁殖系数、不定芽诱导率、不定根诱导率高。

本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题：

一种多花黄精新品种再生与体外成苗的方法，所述多花黄精新品种为祁源黄精，所述方法包括以下步骤：以所述祁源黄精块茎萌发幼苗的幼嫩叶片为外植体，经表面消毒后，剪切成适宜大小的切块后，经不定芽诱导、不定芽增殖和伸长、瓶外不定根诱导处理、定植及成苗管理步骤最终获得祁源黄精完整再生植株；

所述幼嫩叶片的叶龄为13-17d；

所述不定芽诱导采用的培养基为含有0.5-2.0mg/L TDZ、0.5-2.5mg/LAgNO₃、3.0％(w/v)蔗糖和琼脂的DKW培养基；

所述不定芽增殖和伸长采用的培养基为含有0.05-1.0mg/L TDZ、0.05-0.25mg/LIAA、0.5-2.5mg/L GA₃、3.0％(w/v)蔗糖和琼脂的DKW培养基；

所述瓶外不定根诱导处理采用的培养基为含有500-1000mg/L K-IBA、100-500mM褪黑素和200-500mg/L NAA的生根促进液。