[发明专利]一种人源化抗人γδTCR单克隆抗体及其编码基因、制备方法和应用

权利要求书

1.一种人源化抗人γδTCR单克隆抗体，其重链可变区包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列或由其组成，轻链可变区包含SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列或由其组成。

2.根据权利要求1所述的人源化抗人γδTCR单克隆抗体，其重链铰链区和恒定区包含SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列或由其组成，轻链恒定区包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列或由其组成。

3.根据权利要求1或2所述的人源化抗人γδTCR单克隆抗体，其重链包含SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列或由其组成，轻链包含SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列或由其组成。

4.一种编码权利要求1-3中任一项所述的人源化抗人γδTCR单克隆抗体的基因；

优选地，其中编码所述人源化抗人γδTCR单克隆抗体的重链的基因包含如SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:16所示的核苷酸序列或由其组成，编码所述人源化抗人γδTCR单克隆抗体的轻链的基因包含如SEQ ID NO:14所示的核苷酸序列或由其组成。

5.含有权利要求4所述的基因的表达载体、转基因细胞系和宿主菌。

6.一种制备权利要求1-3中任一项所述的人源化抗人γδTCR单克隆抗体的方法，其包括以下步骤：

1)将鼠源抗人γδTCR单克隆抗体的重轻链可变区的CDR分别移植到人源化重轻链可变区模板中，分别得到人源化抗体重轻链可变区的氨基酸序列，其中所得人源化抗体重链可变区包含如SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列或由其组成，所得人源化抗体轻链可变区包含如SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列或由其组成；

2)将步骤1)所得人源化抗体重轻链可变区的氨基酸序列分别与人源化抗体重轻链恒定区的氨基酸序列连接，分别得到人源化抗体的重链和轻链的氨基酸序列；

3)将步骤2)所得人源化抗体的重链和轻链的氨基酸序列进行逆翻译后，分别得到人源化抗体的重链和轻链的编码基因；和

4)对步骤3)所得人源化抗体的重链和轻链的编码基因进行真核表达，得到所述人源化抗人γδTCR单克隆抗体。

7.权利要求1-3中任一项所述的人源化抗人γδTCR单克隆抗体在活化扩增γδT细胞中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其中所述扩增的方式包括固相化体外扩增；和/或

所述人源化抗人γδTCR单克隆抗体还联合细胞因子对所述γδT细胞进行活化扩增；可选地，所述细胞因子包括IL-15、IL-21、或其组合。

9.权利要求1-3中任一项所述的人源化抗人γδTCR单克隆抗体或由权利要求1-3中任一项所述的人源化抗人γδTCR单克隆抗体扩增获得的γδT细胞在制备杀伤肿瘤细胞的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其中所述肿瘤细胞包括但不限于Daudi细胞、K562细胞、OVCAR-8细胞、HepG2细胞和SW480细胞。