[发明专利]掌式一体化磁富集等温扩增检测设备及微生物检测方法

权利要求书

1.一种掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于，包括：

扩增盒，所述扩增盒形成有检测腔，所述扩增盒开设有与所述检测腔连通的观察口，所述观察口的外侧用于布置终端，所述终端用于获取并处理荧光图像；

扩增架，所述扩增架安放在所述检测腔内，所述扩增架包括用于容纳扩增管的第一安放孔，所述扩增架还包括通光孔和出光孔，所述通光孔和所述出光孔分别与所述第一安放孔连通，所述出光孔的位置与所述观察口相对应；

加热元件，所述加热元件安装在所述扩增架上，所述加热元件与所述扩增管传热连接；光源，所述光源布置在所述检测腔内，所述光源与所述通光孔光路连接，所述光源用于激发所述荧光图像；

混匀架，所述混匀架可转动地安装在所述扩增盒的外侧，所述混匀架包括用于容纳离心管的第二安放孔；

磁力元件，所述磁力元件安装在所述扩增盒的外侧。

2.根据权利要求1所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于：所述光源采用LED灯，所述LED灯的中心波长为495nm，所述掌式一体化磁富集等温扩增检测设备包括第一滤光片和第二滤光片，所述第一滤光片设置在所述光源和所述通光孔之间，所述第一滤光片为带通滤光片，所述第一滤光片的中心波长为498nm，所述第二滤光片设置在所述观察口，所述第二滤光片为高通滤光片，所述第二滤光片的起始波长为510nm。

3.根据权利要求2所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于：所述检测腔包括第一腔室和第二腔室，所述第二腔室位于所述第一腔室的下方，所述第二腔室和所述第一腔室通过连通孔连通，所述光源安装在所述第二腔室，所述扩增架位于所述连通孔的上方，所述通光孔位于所述扩增架的底部。

4.根据权利要求3所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于：所述通光孔沿竖直方向，所述出光孔沿水平方向。

5.根据权利要求3所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于：所述扩增架和所述检测腔的表面为吸光表面。

6.根据权利要求1所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于：所述扩增架采用金属材料，所述加热元件贴附在所述扩增架的外表面，所述第一安放孔的形状与所述扩增管的形状相对应。

7.根据权利要求6所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于：所述加热元件和所述扩增架之间涂覆导热硅脂和/或粘贴导热胶带。

8.根据权利要求1所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，其特征在于：所述观察口位于所述扩增盒的顶部，所述掌式一体化磁富集等温扩增检测设备包括反射镜，所述反射镜位于从所述出光孔到所述观察口的光路上。

9.一种微生物检测方法，其特征在于，微生物检测方法使用终端以及权利要求1至8任一项所述的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备，优选地，所述微生物检测方法包括以下步骤：

S1、制作偶联适配体的磁珠；

S2、加入待测样本进行目标DNA分离及洗脱；

S3、基于LAMP扩增所述目标DNA；

S4、数据采集与处理；

优选地，所述步骤S3包括：

向扩增管加入LAMP反应体系，所述LAMP反应体系包括与微生物对应的引物探针组合物；

加热元件加热所述扩增管，进行LAMP反应，得到LAMP反应产物；

优选地，所述LAMP反应体系包括引物探针组合物；

所述引物包括：

正向外引物F3：序列如SEQ ID NO.2；

反向外引物B3：序列如SEQ ID NO.3所示；

正向内引物FIP：序列如SEQ ID NO.4所示；

反向内引物BIP：序列如SEQ ID NO.5所示；

正向环引物LF：序列如SEQ ID NO.6所示；

反向环引物LB：序列如SEQ ID NO.7所示；

所述探针的序列如SEQ ID NO.8所示。

10.根据权利要求9所述的微生物检测方法，其特征在于，所述LAMP反应体系还包含：缓冲溶液、DNA聚合酶、镁离子、dNTPs；优选地，所述LAMP反应体系中各组分的浓度为：7-9mM的dNTPs、24-26mM的镁离子、0.8-1.2mM的缓冲溶液和9-11mM的DNA聚合酶。