[发明专利]掌式一体化磁富集等温扩增检测设备及微生物检测方法在审
申请号: | 202211206733.1 | 申请日: | 2022-09-30 |
公开(公告)号: | CN115992047A | 公开(公告)日: | 2023-04-21 |
发明(设计)人: | 张建民;韩宇星;贾开元;廖明;勾红潮;肖仁行;林琦杰;梁玉岑;蔡明睿;李晓欣;王俊舒 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/34;C12M1/42;C12M1/02;C12M1/00;C12Q1/6844;C12Q1/689;C12N15/11;C12R1/42 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 聂志伟 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一体化 富集 等温 扩增 检测 设备 微生物 方法 | ||
本申请提出一种掌式一体化磁富集等温扩增检测设备及微生物检测方法,掌式一体化磁富集等温扩增检测设备包括扩增盒、扩增架、加热元件、光源、混匀架和磁力元件,扩增盒形成有检测腔,扩增盒开设有观察口,扩增架安放在检测腔内,扩增架包括用于容纳扩增管的第一安放孔,扩增架还包括通光孔和出光孔,通光孔和出光孔分别与第一安放孔连通,出光孔的位置与观察口相对应,加热元件安装在扩增架上,加热元件与扩增管传热连接,光源布置在检测腔内,光源与通光孔光路连接,混匀架可转动地安装在扩增盒的外侧,混匀架包括第二安放孔,磁力元件安装在扩增盒的外侧。掌式一体化磁富集等温扩增检测设备便于携带和现场使用。
技术领域
本申请涉及微生物检测领域,特别是一种掌式一体化磁富集等温扩增检测设备及微生物检测方法。
背景技术
沙门氏菌属(Salmonella)是引起细菌性食物中毒的重要病原体之一,也是肠杆菌科中最复杂的菌属,属革兰氏阴性菌。沙门氏菌的多种血清型可以引起中毒,以鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌和肠炎沙门菌最常见。沙门氏菌中毒的症状主要由急性肠胃炎为主,潜伏期一般为四至四十八小时,短期是数小时,长期是两天至三天,前期症状有恶心、头疼,全身乏力和发冷等,主要症状有呕吐、腹泻、腹疼,粪便以黄绿色水样便,有时带脓血和黏液,一般发热的温度在三十八摄氏度至四十摄氏度,重病人出现打寒战、惊厥、抽搐和昏迷的症状。传统的PCR检测方法需要PCR仪器的支持,只能在实验室中进行,难以及时、快速地进行检测。
环介导等温扩增方法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种可以在60~70℃开启扩增反应的核酸扩增技术,扩增时不依赖热循环仪器,非常适合开发对应的小型化现场检测设备。现有技术中出现了一些基于LAMP的检测装置,实现了沙门氏菌的现场检测。
但是,现场获取到的样品中可能含有很多杂质,会影响到沙门氏菌检测的灵敏度,此外,目前通用的LAMP检测装置在扩增显色之后依靠肉眼观察来判断检测结果,也容易影响到检测的准确度。
发明内容
本申请旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本申请提出一种掌式一体化磁富集等温扩增检测设备及微生物检测方法,掌式一体化磁富集等温扩增检测设备能够提高现场检测的准确度。
根据本申请提供的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备,包括扩增盒、扩增架、加热元件、光源、混匀架和磁力元件,所述扩增盒形成有检测腔,所述扩增盒开设有与所述检测腔连通的观察口,所述观察口的外侧用于布置终端,所述终端用于获取并处理荧光图像,所述扩增架安放在所述检测腔内,所述扩增架包括用于容纳扩增管的第一安放孔,所述扩增架还包括通光孔和出光孔,所述通光孔和所述出光孔分别与所述第一安放孔连通,所述出光孔的位置与所述观察口相对应,所述加热元件安装在所述扩增架上,所述加热元件与所述扩增管传热连接,所述光源布置在所述检测腔内,所述光源与所述通光孔光路连接,所述光源用于激发所述荧光图像,所述混匀架可转动地安装在所述扩增盒的外侧,所述混匀架包括用于容纳离心管的第二安放孔,所述磁力元件安装在所述扩增盒的外侧。
根据本申请提供的掌式一体化磁富集等温扩增检测设备,至少具有如下技术效果:通过设置混匀架和磁力元件,掌式一体化磁富集等温扩增检测设备能够使用磁珠对现场采集到的样品进行富集和洗脱,提纯目标DNA,之后再通过扩增架进行扩增,通过终端对光源激发的荧光图像进行更加精准的分析判断,从而使得掌式一体化磁富集等温扩增检测设备能够提高现场检测的准确度,掌式一体化磁富集等温扩增检测设备将磁富集、LAMP以及荧光激发所需的结构集成在扩增盒上,便于携带和现场使用。
根据本申请的一些实施例,所述光源采用LED灯,所述LED灯的中心波长为495nm,所述掌式一体化磁富集等温扩增检测设备包括第一滤光片和第二滤光片,所述第一滤光片设置在所述光源和所述通光孔之间,所述第一滤光片为带通滤光片,所述第一滤光片的中心波长为498nm,所述第二滤光片设置在所述观察口,所述第二滤光片为高通滤光片,所述第二滤光片的起始波长为510nm。
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