[发明专利]一种间充质干细胞复合冻存液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种间充质干细胞复合冻存液，所述复合冻存液中包括基础冻存液、终浓度为50-500 µM的去铁胺和终浓度为1-20 µM的曲恩汀。

2.根据权利要求1所述的复合冻存液，其特征在于，所述基础冻存液由冷冻保护剂、抗氧化剂和等渗溶液组成，其中，冷冻保护剂选自甘油、乙二醇、乙酰胺、聚维酮K30、羟乙基淀粉、海藻糖中的一种或两种以上的组合；抗氧化剂选自谷胱甘肽、L-肌肽、硫辛酸、维生素C中的一种或两种以上的组合。

3.根据权利要求1所述的复合冻存液，其特征在于，所述复合冻存液中含有去铁胺和曲恩汀，去铁胺终浓度为100 µM，曲恩汀终浓度为5 µM。

4.根据权利要求2所述的复合冻存液，其特征在于，所述冷冻保护剂为甘油，聚维酮K30和海藻糖的组合；抗氧化剂为谷胱甘肽、L-肌肽以及维生素C的组合；等渗溶液选自葡萄糖氯化钠溶液、复方氨基酸溶液和复方电解质溶液的组合。

5.根据权利要求2所述的复合冻存液，其特征在于，按质量份数计，每100份基础冻存液包括甘油5-15份，聚维酮K30 1-4份，海藻糖0.5-2.5份，谷胱甘肽0.1-0.25份，L-肌肽0.05-0.1份，维生素C 0.1-0.3份，复方氨基酸溶液20-30份，复方电解质溶液20-30份，余量为葡萄糖氯化钠溶液。

6.根据权利要求5所述的复合冻存液，其特征在于，所述基础冻存液包括甘油10份，聚维酮K30 2份，海藻糖1.5份，谷胱甘肽0.15份，L-肌肽0.05份，维生素C 0.3份，复方氨基酸溶液20 份，复方电解质溶液20份，葡萄糖氯化钠溶液46份。

7.一种权利要求1-6任一所述的间充质干细胞复合冻存液的制备方法，具体包括以下步骤：

（1）用葡萄糖氯化钠溶液溶解聚维酮K30，海藻糖，谷胱甘肽，L-肌肽和维生素C，加入甘油、复方氨基酸溶液和复方电解质溶液混匀，过滤除菌，4℃条件下保存，得到基础冻存液；

（2）向上述冻存液中加入去铁胺和曲恩汀，溶解后过滤除菌，4℃条件下保存，得到间充质干细胞复合冻存液。

8.一种权利要求1-6任一所述的复合冻存液在间充质干细胞冻存和复苏中的应用，所述间充质干细胞为人间充质P1-P9代干细胞，选自脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、牙髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞、胎盘间充质干细胞中的一种。