[发明专利]白花前胡不定芽的繁殖方法

权利要求书

1.白花前胡不定芽的繁殖方法，其特征在于依次包括以下步骤：

1)、外植体灭菌：

选择长势良好的白花前胡植株，首先流水清洗植株，然后切取植株茎尖作为外植体材料；

将外植体材料消毒后，用无菌滤纸吸干外植体材料表面水分，用无菌手术刀修整，从而将茎尖外层变色的组织切除，得茎尖外植体；

2)、无菌苗培养：

将步骤1)得到的茎尖外植体接种到扩繁培养基中，在植物组织培养室内于24±1℃培养，直至在外植体上诱导出长度≥0.5cm且个数≥5个的不定芽才结束培养；

扩繁培养基为：1L的MS+2.4～2.6mg 6-BA、20～30g白砂糖、4～9g琼脂，pH 5.8±0.2；

3)、生根培养：

将步骤2)所得的白花前胡无菌苗上的每个长度≥0.5cm的不定芽分别进行切割，得单芽；

将单芽转接到生根培养基中，在植物组织培养室内培养，培养温度24±1℃，直至获得根数≥5根且株高≥3.0cm的生根后白花前胡无菌组培苗；

生根培养基为：1L的1/2MS+0.2mg NAA+20～30g白砂糖+4～9g琼脂，pH 5.8±0.2；

4)、组培苗驯化移栽：

将步骤3)所得的生根后白花前胡无菌组培苗放入水培瓶内利用霍格兰营养液进行水培养，培养温度为24±1℃，水培瓶做遮光处理；直至当培养至株高≥15cm且根长≥10cm的根至少有5根时，结束此步骤。

2.根据权利要求1所述的白花前胡不定芽的繁殖方法，其特征在于：步骤1)中的消毒为：将外植体材料用70％～75％的乙醇消毒后，用无菌水冲洗；然后用0.1％的HgCl₂消毒10～15min，无菌水冲洗至少3次。

3.根据权利要求2所述的白花前胡不定芽的繁殖方法，其特征在于：步骤1)中，70％～75％乙醇消毒时间为30±5s；0.1％HgCl₂消毒茎尖的时间在12～15min。