[发明专利]一种低温高活力碱性蛋白酶突变体及其应用在审
| 申请号： | 202211227211.X | 申请日： | 2022-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN115851679A | 公开（公告）日： | 2023-03-28 |
| 发明（设计）人： | 路福平;刘逸寒;李玉;马向阳;刘夫锋;张会图;王洪彬 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/54 | 分类号： | C12N9/54;C12N15/57;C12N15/70;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/07;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 低温 活力 碱性 蛋白酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体是在SEQ ID NO.1所示野生型碱性蛋白酶的基础上发生G95P、A96D、S99W、S101T、P127S、S126T突变中的至少一种获得的。
2.如权利要求1所述的一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述碱性蛋白酶突变体为G95P突变体、G95P/A96D突变体、G95P/A96D/S99W突变体、G95P/A96D/S99W/S101T突变体、G95P/A96D/S99W/S101T/P127S突变体、或G95P/A96D/S99W/S101T/P127S/S126T突变体。
3.如权利要求2所述的一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述G95P突变体，具有SEQID NO.3所示的氨基酸序列；所述G95P/A96D突变体，具有SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列；所述G95P/A96D/S99W突变体，具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列；所述G95P/A96D/S99W/S101T突变体，具有SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列；所述G95P/A96D/S99W/S101T/P127S突变体，具有SEQ ID NO.11所示的氨基酸序列；所述G95P/A96D/S99W/S101T/P127S/S126T突变体，具有SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列。
4.权利要求2所述碱性蛋白酶突变体的编码基因。
5.如权利要求4所述的编码基因，其特征在于，所述G95P突变体的编码基因aprm1具有SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列；所述G95P/A96D突变体的编码基因aprm2具有SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列；所述G95P/A96D/S99W突变体的编码基因aprm3，具有SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列；所述G95P/A96D/S99W/S101T突变体的编码基因aprm4，具有SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列；所述G95P/A96D/S99W/S101T/P127S突变体的编码基因aprm5，具有SEQ IDNO.12所示的核苷酸序列；所述G95P/A96D/S99W/S101T/P127S/S126T突变体的编码基因aprm6，具有SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列。
6.包含权利要求4所述编码基因的重组质粒或重组菌株。
7.如权利要求6所述的重组质粒或重组菌株，其特征在于，采用的表达载体为pLY-3，宿主细胞为大肠杆菌WB600，或者宿主细胞为解淀粉芽孢杆菌CGMCC No.11218。
8.权利要求6所述的重组质粒或重组菌株在生产碱性蛋白酶中的应用。
9.权利要求1所述碱性蛋白酶突变体的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，是在洗涤剂、制革、食品、饲料领域的应用。
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