[发明专利]从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法

权利要求书

1.一种从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法，其特征在于，所述方法包括：

S1、对富硒茶叶进行预处理：将富硒茶叶片洗净、杀青、干燥、粉碎、过筛，制备富硒茶粉；其中，所述过筛处理中筛子的目数选取为60目；

S2、对所述富硒茶粉进行酶解破壁处理：向所述富硒茶粉中加入纯水，按预置纯水料液比制备富硒茶匀浆，随后向所述富硒茶匀浆中加入复合破壁酶，在预置破壁条件下制备富硒茶破壁液；其中，所述预置纯水料液比为富硒茶粉：纯水=1:45~50，所述预置破壁条件为：破壁体系温度为50~55℃，pH为6.5~7，破壁时间为3~4h；

S3、对所述富硒茶破壁液依次进行超声破碎及离心分离处理：在预置超声条件下对所述富硒茶破壁液进行超声细胞破碎，随后在预置离心条件下对所述富硒茶破壁液进行离心分离，待所述富硒茶破壁液冷却后，分别收集上清液与下层沉淀；其中，所述预置超声条件为：超声温度为50~60℃，超声波功率为300~350W，超声时间为15~20min；所述预置离心条件为：离心转速为3000rpm，离心时间为10~15min；

S4、茶多酚的制备：取所述上清液，依次对所述上清液进行第一超滤膜过滤、真空旋蒸浓缩、第一真空冷冻干燥处理，制备可食用级茶多酚；其中，所述第一超滤膜的切割分子量为60~80KDa，真空旋蒸浓缩处理的温度为50~55℃，真空泵压力为0.09~0.1Pa，旋蒸时间为2~3h；

S5、取所述下层沉淀，依次对所述下层沉淀进行碱提取、酶解、超滤膜过滤，以制备茶硒肽：取所述下层沉淀加入碱液，搅拌反应3h，按预置碱液料液比制备茶蛋白碱液；向所述茶蛋白碱液中加入碱性蛋白酶，50~60℃下恒温水浴反应2~3h，酶解过程中保持所述茶蛋白碱液的pH为8.5~9，反应结束后对所述茶蛋白碱液进行离心分离并收集茶蛋白碱液上清液，将所述茶蛋白碱液上清液置于沸水浴中加热10~15min进行灭酶处理；向所述茶蛋白碱液上清液中加入1mol/L HCL溶液，调整所述茶蛋白碱液上清液的pH为6~7，随后依次使用第二超滤膜、第三超滤膜、第四超滤膜对所述茶蛋白碱液上清液进行过滤，以截留大分子蛋白质，取滤过液依次进行反渗透膜浓缩、第二真空冷冻干燥处理，制备茶硒肽；其中，所述预置碱液料液比为下层沉淀：碱液=1：15~25；所述茶蛋白碱液的离心分离处理中，离心机转速为2500rpm；所述第二超滤膜的切割分子量为10KDa，所述第三超滤膜的切割分子量为5KDa，所述第四超滤膜的切割分子量为1KDa。

2.根据权利要求1所述的一种从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法，其特征在于，步骤S2中所述复合破壁酶为纤维素酶和果胶酶的混合酶，纤维素酶和果胶酶的质量比为1：1，所述复合破壁酶的酶活力为20000~30000U/g。

3.根据权利要求1所述的一种从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法，其特征在于，所述第一真空冷冻干燥的步骤包括：

S41、对真空旋蒸浓缩后的上清液进行预冻处理：将真空旋蒸浓缩后的上清液置于-40~ -35℃的冰箱中，静置20 ~ 30h；

S42、将预冻处理后的上清液样品取出并置于冷冻干燥机中，在温度为-40 ~ -15℃条件下，干燥15 ~ 20h，所述冷冻干燥机的真空度＞0.1mmHg；随后，在温度为10 ~ 15℃条件下，干燥8 ~ 10h，所述冷冻干燥机的真空度＞0.1mmHg；制备可食用级茶多酚。

4.根据权利要求1所述的一种从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法，其特征在于，所述第二真空冷冻干燥步骤与所述第一真空冷冻干燥步骤相同。

5.根据权利要求1所述的一种从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法，其特征在于，步骤S5中所使用的碱液，为0.3~0.5g/L 的NaOH溶液，所述碱液的pH为8.5~9。

6.根据权利要求1所述的一种从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法，其特征在于，步骤S5中所使用的碱性蛋白酶的酶活力为200000~300000U/g，所述碱性蛋白酶的底物浓度为2~3%。

7.根据权利要求1所述的一种从茶叶中联合提取茶多酚、茶硒肽的方法，其特征在于，所述食用级茶多酚中茶多酚的含量为40~50%，茶多酚的收率为10%~15%。