[发明专利]提高重组蛋白质可溶性表达的方法在审
申请号: | 202211243921.1 | 申请日: | 2022-10-11 |
公开(公告)号: | CN116083431A | 公开(公告)日: | 2023-05-09 |
发明(设计)人: | 马俊;赵弘;龙星霞;于铁妹;潘俊锋;刘建 | 申请(专利权)人: | 深圳瑞德林生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/70;C12N15/90;C12R1/19 |
代理公司: | 深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙) 44285 | 代理人: | 张晓 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区粤海街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提高 重组 蛋白质 可溶性 表达 方法 | ||
1.lacUV5启动子变体,其-35区缺失一个碱基T。
2.根据权利要求1所述的lacUV5启动子变体,其核酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.基因表达盒,其包括权利要求1所述的lacUV5启动子变体和结构基因。
4.根据权利要求3所述的基因表达盒,其特征在于,所述结构基因为T7RNA聚合酶结构基因。
5.质粒载体,其包括:
载体骨架和权利要求1或2所述的lacUV5启动子变体;
和/或载体骨架和权利要求3或4所述的基因表达盒。
6.宿主,其含有:
如权利要求1或2所述的lacUV5启动子变体;
和/或如权利要求3或4所述的基因表达盒;
和/或如权利要求5所述的质粒载体。
7.根据权利要求6所述的宿主,其特征在于,所述的宿主为大肠杆菌。
8.权利要求6或7所述的宿主的构建方法,其包括将如下I)~III)所示中的至少一种转染或转化进入宿主:
I)、权利要求1或2所述的lacUV5启动子变体;
II)、权利要求3或4所述的基因表达盒;
III)、权利要求5所述的质粒载体。
9.根据权利要求8所述的构建方法,其特征在于,所述进入宿主细胞采用λRed系统。
10.如下i)~v)所示中的至少一种在蛋白表达中的应用:
i)、权利要求1或2所述的lacUV5启动子变体,
ii)、权利要求3或4所述的基因表达盒;
iii)、权利要求5所述的质粒载体;
iv)、权利要求6或7所述的宿主;
v)、权利要求8或9所述的构建方法构建的宿主。
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