[发明专利]一种厌氧硫酸酯酶成熟酶基因、厌氧硫酸酯酶成熟酶及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种厌氧硫酸酯酶成熟酶基因、厌氧硫酸酯酶成熟酶及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。所述厌氧硫酸酯酶成熟酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的厌氧硫酸酯酶成熟酶对硫酸酯酶具有修饰活性。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种厌氧硫酸酯酶成熟酶基因、厌氧硫酸酯酶成熟酶及其制备方法和应用。

背景技术

细菌硫酸酯酶通常起到清除剂的作用，其可以从外源底物中去除硫酸盐基团，为细菌的生长繁殖提供硫和碳源，在细菌的定植和致病过程中有着至关重要的作用，例如在溃疡性结肠炎(UC)患者的粪便提取物中检测到粘蛋白硫酸酯酶活性增加，铜绿假单胞菌硫酸酯酶(Atsa)可以促进其在肠道的定植。

细菌硫酸酯酶需要将关键活性位点半胱氨酰或丝氨酰残基进行必要的翻译后修饰，使其变为通常称为Cα-甲酰甘氨酸(FGly)才能发挥水解活性，进而从广泛的反应底物中去除硫酸基团，为细菌提供营养物质，如利用硫酸化多糖和结肠粘蛋白。这种翻译后修饰由厌氧硫酸酯酶成熟酶(anSME)进行厌氧催化，该酶是自由基AdoMet超家族的成员。很多机会致病菌如产气荚膜梭菌ATCC 13124，铜绿假单胞菌，肺炎克雷伯菌，多形拟杆菌等均携带硫酸酯酶及其成熟酶基因。Goldman PJ等人(Goldman PJ,Grove TL,Sites LA,McLaughlinMI,Booker SJ,Drennan CL.X-ray structure of an AdoMet radical activase revealsan anaerobic solution for formylglycine posttranslational modification.ProcNatlAcad Sci U S A.2013May 21；110(21):8519-24.)表征了产气荚膜梭菌ATCC 13124的厌氧硫酸酯酶成熟酶并验证了其具有修饰硫酸酯酶的活性特征；Hickey CA等人(HickeyCA,Kuhn KA,Donermeyer DL,PorterNT,Jin C,Cameron EA,Jung H,Kaiko GE,Wegorzewska M,Malvin NP,Glowacki RW,Hansson GC,Allen PM,Martens EC,Stappenbeck TS.Colitogenic Bacteroides thetaiotaomicronAntigens Access HostImmune Cells in a Sulfatase-Dependent Manner via Outer Membrane Vesicles.CellHost Microbe.2015May 13；17(5):672-80.)证明了厌氧硫酸酯酶成熟酶基因是多形拟杆菌引发小鼠结肠炎所必须的，当敲除了厌氧硫酸酯酶成熟酶基因，多形拟杆菌不会引发小鼠结肠炎症。所以厌氧硫酸酯酶成熟酶anSME是一种新的炎症性肠道疾病的药物靶点，该酶的研究对于肠道疾病的预防和治疗有重要的意义。但迄今为止国内尚未有相关厌氧硫酸酯酶成熟酶anSME的研究报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种厌氧硫酸酯酶成熟酶基因、厌氧硫酸酯酶成熟酶及其制备方法和应用，本发明提供的厌氧硫酸酯酶成熟酶对硫酸酯酶具有修饰活性。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种厌氧硫酸酯酶成熟酶基因，所述厌氧硫酸酯酶成熟酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本发明还提供了上述技术方案所述的厌氧硫酸酯酶成熟酶基因在修饰硫酸酯酶中的应用。

本发明还提供了一种由上述技术方案所述的厌氧硫酸酯酶成熟酶基因编码的厌氧硫酸酯酶成熟酶，所述厌氧硫酸酯酶成熟酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

本发明还提供了上述技术方案所述的厌氧硫酸酯酶成熟酶在修饰硫酸酯酶中的应用。

本发明还提供了一种上述技术方案所述厌氧硫酸酯酶成熟酶的制备方法，包括以下步骤：