[发明专利]一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法

权利要求书

1.一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分别取茶类氨基酸化合物对照品经溶解、稀释过滤后，取对照品过滤液放入串联液质联用仪中测定得到的图谱信息后建立对比数据库；

(2)取六堡茶样品经提取、离心、过滤后，取过滤液放入串联液质联用仪中测定，将得到的测定图谱信息与步骤(1)的对比数据库进行匹配后得到测定结果。

2.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中，所述的茶类氨基酸化合物对照品包括胱氨酸、色氨酸、络氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、甲硫氨酸、谷氨酸、赖氨酸、门冬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、脯氨酸、丝氨酸、丙氨酸、甘氨酸、茶氨酸。

3.根据权利要求1或2所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中，称取茶类氨基酸化合物对照品使用浓度为30％的乙腈水作为溶剂对其进行溶解并稀释，待用。

4.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，所述的步骤(2)中，取六堡茶样品加入浓度为30％的乙腈水中，所加入的六堡茶样品的质量与乙腈水的体积比为1：20，超声提取20min，放至室温后在4℃下离心10min，离心速度为9000r/min。

5.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，所述的步骤(1)和步骤(2)中，使用0.2μm有机膜将溶液过滤。

6.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，所述的步骤(1)和步骤(2)的测定包括液相色谱测定和质谱测定：

所述液相色谱测定条件为：

色谱柱：亲水作用色谱柱，规格为2.1mm×100mm，2.6um；进样量：2μL；柱温：35℃；流速：0.4mL/min；流动相A为0.1％甲酸水溶液，B为乙腈；采用梯度洗脱模式：0～5min：10％A～35％A，90％B～65％B；5～5.01min：35％A～40％A，65％B～60％B；5.01～6.5min：40％A～90％A，60％B～10％B；

所述质谱测定条件为：

干燥气温度：290℃；干燥气流速：12L/min；雾化器压力：45Psi；鞘气温度：400℃；鞘气流速：11L/min；毛细管电压：3500V；喷嘴电压：1000V；裂解电压380V；扫描模式为自动二级采集模式，正模式，扫描范围1级50～500m/z，扫描范围2级50～500m/z，碰撞能量5～15V。

7.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中，所建立的对比数据库中包括各茶类氨基酸化合物名称、分子式、CAS号、精确质荷比和二级离子精确质荷比。

8.根据权利要求7所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法，其特征在于，将六堡茶样品的测定图谱信息与步骤(1)的对比数据库进行匹配的具体步骤为：

(1)从对比数据库中逐一抽取各茶类氨基酸化合物的精确质荷比，从六堡茶样品的测定图谱信息中获取其精确质荷比，两者进行匹配，若两个精确质荷比偏差小于5ppm，即进入下一步，认为不存在该化合物，进行下一茶类氨基酸化合物的匹配；

(2)从对比数据库中抽取该茶类氨基酸化合物的二级离子精确质荷比，从六堡茶样品的测定图谱信息中获取其二级离子精确质荷比，两者进行匹配，若两个二级离子精确质荷比偏差小于10ppm，即确定含有该茶类氨基酸化合物，否则认为不存在该化合物，返回步骤(1)进行下一茶类氨基酸化合物的匹配。