[发明专利]一种小核糖核酸属病毒的检测引物和检测方法

权利要求书

1.一种小核糖核酸属病毒的检测引物，其特征在于：所述引物的核苷酸序列如下所示：

LYJ-H-F：5’-GGTCTATGCTGTATCCAAA-3’，

LYJ-H-R：5’-ATATTGTCAAGCTGGTGAG-3’；

所述小核糖核酸属病毒的全基因组序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的一种小核糖核酸属病毒的检测引物，其特征在于：所述引物对全基因组序列如SEQ ID NO.1所示的小核糖核酸属病毒扩增出408bp的产物。

3.一种检测权利要求1中所述的小核糖核酸属病毒的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

1）提取待测样本的RNA，反转录成cDNA；

2）以步骤1）反转录得到的cDNA作为模板，利用权利要求1所述的引物按如下PCR反应体系和反应条件对全基因组序列如SEQ ID NO.1所示的小核糖核酸属病毒进行检测：

PCR反应体系总体积25μL：ddH₂O 15.8μL，10×Taq Buffer 2.5μL，25mM MgCl₂ 1.5μL，dNTP Mix 2.0μL，LYJ-H-F 1μL，LYJ-H-R 1μL，cDNA模板 1μL，Hieff® Taq DNAPolymerase 0.2μL；

PCR反应条件：94℃预变性3min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1-2kb/min，30个循环；72℃终延伸5min；

3）将步骤2）得到的PCR产物进行琼脂凝胶电泳，根据电泳后的条带大小鉴定样品模板中是否存在所述小核糖核酸属病毒。