[发明专利]环状RNA及载体和载体的应用

权利要求书

1.一种环状RNA，其特征在于，所述环状RNA包括能与靶RNA通过碱基互补配对进行特异性结合的反义序列，以及连接在所述反义序列两侧的5′连接序列和3′连接序列；所述5′连接序列可以与所述3′连接序列互补配对连接形成茎环结构；

所述靶RNA为DMD基因的51号外显子、MET基因13号外显子、MET基因14号外显子、KRAS基因2号外显子、KRAS基因3号外显子、STAT3基因7外显子和STAT3基因8号外显子中的一种。

2.根据权利要求1所述的环状RNA，其特征在于，所述5′连接序列的DNA序列如SEQ IDNO.1所示；所述3′连接序列的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根据权利要求1所述的环状RNA，其特征在于，所述反义序列为靶向DMD基因51号外显子反义序列，DNA序列如SEQ ID NO.3至SEQ ID NO.7中任一项所示；

所述反义序列为靶向MET基因13号外显子片段的反义序列，DNA序列如SEQ ID NO.8所示；

所述反义序列为靶向MET基因14号外显子片段的反义序列，DNA序列如SEQ ID NO.9所示或SEQ ID NO.10所示；

所述反义序列为KRAS基因2号外显子片段的反义序列，DNA序列如SEQ ID NO.11所示；

所述反义序列为KRAS基因3号外显子片段的反义序列，DNA序列如SEQ ID NO.12所示；

所述反义序列为STAT3基因7外显子片段的反义序列，DNA序列如SEQ ID NO.13所示；

所述反义序列为STAT3基因8外显子片段的反义序列，DNA序列如SEQ ID NO.14所示。

4.一种载体，其特征在于，包括权利要求1至4中任一项所述的环状RNA，连接在3′连接序列上的扭转核酶，连接在5′连接序列上的扭转核酶，启动子和表达载体。

5.根据权利要求4所述的载体，其特征在于，所述连接在5′连接序列上的扭转核酶为可以在5′末端产生游离羟基的核酶；所述连接在3′连接序列上的扭转核酶为可以在3′末端产生2’,3’-环磷酸酯的核酶；

和/或，所述启动子为RNA聚合酶Ⅲ启动子；

和/或，所述表达载体为质粒或病毒载体。

6.根据权利要求5所述的载体，其特征在于，所述连接在5′连接序列上的扭转核酶为扭转核酶P3 U2A，所述连接在3′连接序列上的扭转核酶为扭转核酶P1；

所述扭转核酶P3 U2A的DNA序列如SEQ ID NO.15所示；

扭转核酶P1的DNA序列如SEQ ID NO.16所示。

7.根据权利要求5所述的载体，其特征在于，所述RNA聚合酶Ⅲ启动子为人U6启动子；所述病毒载体为AAV载体或慢病毒载体。

8.一种权利要求4至7中任一项所述载体在制备用于调控外显子跳跃的药物中的应用。

9.一种权利要求4至7中任一项所述载体在制备用于治疗基因变异导致疾病的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述基因变异导致疾病为因DMD基因51号外显子变异造成的杜氏肌无力症。