[发明专利]一种白血病患者来源的骨髓间充质干细胞的培养基与培养方法在审
申请号: | 202211278104.X | 申请日: | 2022-10-19 |
公开(公告)号: | CN115838685A | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
发明(设计)人: | 周芙玲;吴金娴;黎鑫琦 | 申请(专利权)人: | 武汉大学中南医院 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 江慧 |
地址: | 430071 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白血病 患者 来源 骨髓 间充质 干细胞 培养基 培养 方法 | ||
1.一种白血病患者来源的骨髓间充质干细胞的培养基,其特征在于,所述白血病患者来源的骨髓间充质干细胞的培养基为在基础培养基中添加如下终浓度的组分:0.5-1.5%的L-谷氨酰胺、0.05-0.15 mM的β-巯基乙醇、15-25 ng/ml 的bFGF、0.5-1.5%自体骨髓血来源的血清、10-20%FBS、0.8-1.2%青霉素和链霉素。
2.根据权利要求1所述的一种白血病患者来源的骨髓间充质干细胞的培养基,其特征在于,所述白血病患者来源的骨髓间充质干细胞的培养基为在基础培养基中添加如下终浓度的组分:1%的L-谷氨酰胺、0.1mM的β-巯基乙醇、20ng/ml 的bFGF、1% 自体骨髓血来源的血清、10%FBS、1%青霉素和链霉素。
3.根据权利要求1所述的一种白血病患者来源的骨髓间充质干细胞的培养基,其特征在于,所述基础培养基选自α-MEM、DMEM-F12中的一种。
4.一种白血病来源的间充质干细胞的培养方法,其特征在于,所述方法包括:采用权利要求1-3任一所述的培养基对白血病来源的间充质干细胞进行培养。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法具体包括:将白血病来源的间充质干细胞接种于权利要求1-3任一所述的培养基中,2-4天后换液去除未贴壁细胞,每隔2-3天换液,当细胞汇合度达70-90%时,消化所述细胞进行传代培养。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于,所述培养的条件为:5%CO2,温度37℃。
7.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于,所述白血病来源的间充质干细胞的接种量范围为骨髓单个核细胞106-107个/ml。
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