[发明专利]一种饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法

权利要求书

1.一种饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，包括如下步骤：在母本柱头抽出2~3d时，用含有巨大芽孢杆菌的菌液喷雾于柱头，再用父本花药抽出后2~5d的花粉授粉，收获成熟种子，即可。

2.根据权利要求1所述的一种饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌BM18-2；

优选的，使用的巨大芽孢杆菌BM18-2为含有巨大芽孢杆菌BM18-2的菌液产品，有效活菌数≥2.0亿/mL；

更优选的，巨大芽孢杆菌BM18-2使用时，将有效活菌数≥2.0亿/mL的巨大芽孢杆菌BM18-2菌液产品稀释300-1000倍喷雾于母本柱头上。

3.根据权利要求1所述的一种饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，所述母本为苏丹草-拟高粱杂交种，优选为四倍体苏丹草-拟高粱杂交种SS2010-2。

4.根据权利要求1所述的一种饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，所述父本为甜高粱，优选为甜高粱SS2015。

5.权利要求1-4任一所述的饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法得到的种子。

6.权利要求1-4任一所述的饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，权利要求5所述的种子，在盐土改良中的应用。

7.巨大芽孢杆菌，或含有巨大芽孢杆菌的菌剂，或含有巨大芽孢杆菌的培养物，或含有巨大芽孢杆菌的微生物肥料，在内生细菌共生体育种中的应用；

优选的，所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌BM18-2；

优选的，内生细菌共生体育种为饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育；

更优选的，巨大芽孢杆菌BM18-2，或含有巨大芽孢杆菌BM18-2的菌剂，或含有巨大芽孢杆菌BM18-2的培养物，或含有巨大芽孢杆菌BM18-2的微生物肥料，在饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育中的应用。

8.一种快速鉴定巨大芽孢杆菌BM18-2的CAPS标记，其特征在于，主要包括针对SNP位点设计的引物对及内切酶BspT104 I；

所述引物对的上游引物和下游引物如下：

上游引物F：GTATTACTTGAAGGCAATCGTCCAGC，如SEQ ID No：1所示；

下游引物R：AGCGTCTTCAGCAATGATGACTTCC，如SEQ ID No：2所示。

9.权利要求8所述的CAPS标记，在如下（A1)-（A4）中任一所述的应用；

（A1）鉴定巨大芽孢杆菌BM18-2；

（A2）制备检测巨大芽孢杆菌BM18-2的试剂盒中；

（A3）确定待测样品中是否含有巨大芽孢杆菌BM18-2；

（A4）辅助内生细菌共生体育种。

10.一种快速鉴定巨大芽孢杆菌BM18-2的试剂盒，其特征在于，含有权利要求8所述的CAPS标记。